【摘 要】
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目的多囊卵巢综合征（PCOS）是一种影响全世界5-20%的育龄期女性的内分泌疾病,其中高雄激素血症的发病率高达60-80%。本研究探讨PCOS中雄激素上调AMH的机制,即雄激素对AMH启动子结合位点的影响。为临床研究多囊卵巢综合征的治疗方案,和减少AMH过度升高的不良反应的发生,提供理论基础。方法1、大鼠PCOS模型:3周龄雌性SD大鼠,每日颈部皮下注射去氢表雄酮（DHEA）,连续注射不同日数（空
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目的多囊卵巢综合征（PCOS）是一种影响全世界5-20%的育龄期女性的内分泌疾病,其中高雄激素血症的发病率高达60-80%。本研究探讨PCOS中雄激素上调AMH的机制,即雄激素对AMH启动子结合位点的影响。为临床研究多囊卵巢综合征的治疗方案,和减少AMH过度升高的不良反应的发生,提供理论基础。方法1、大鼠PCOS模型:3周龄雌性SD大鼠,每日颈部皮下注射去氢表雄酮（DHEA）,连续注射不同日数（空白组,对照组和实验组:10d,15d,20d）。阴道开口后,阴道涂片观察动情周期是否紊乱。分别提取血清和卵巢作实验指标测定。2、酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清中睾酮和AMH的含量。3、HE染色观察大鼠卵巢卵泡形态4、免疫组化观察卵巢AMH及其启动子结合位点SF1,GATA4,SOX9的表达情况。5、实时荧光定量PCR（RT-q PCR）检测大鼠卵巢AMH m RNA,SF1 m RNA,GATA4 m RNA,SOX9 m RNA的表达。6、Western blot检测大鼠卵巢AMH,SF1,GATA4,SOX9的蛋白表达。结果1、PCOS造模:通过每日阴道涂片发现,与空白组和对照组相比,实验组发情周期紊乱,发情周期固定在发情后期。HE染色显示,与正常组和对照组相比,15、20日实验组卵巢优势卵泡消失,出现卵巢多囊化。2、ELISA结果:与空白组和对照组相比,大鼠血清睾酮（T）水平15、20日实验组显著高于对照组（P＜0.05）,10日实验组与对照组相比无统计学意义（P＞0.05）;血清AMH水平10、15、20日实验组与对照组相比无统计学意义（P＞0.05）。3、免疫组化结果:AMH及SF1在卵巢颗粒细胞中表达,GATA4在卵巢卵泡表达、SOX9在卵巢颗粒细胞中表达不明显。4、q PCR结果:与空白组和对照组相比,AMH m RNA在15、20日实验组高于对照组（P＜0.05）。SF1 10、20日实验组高于对照组（P＜0.05）,15日对照组显著高于对照组（P＜0.01）。GATA4 15日组高于对照组（P＜0.05）。SOX915、20日组高于对照组（P＜0.05）。5、Western blot结果:与空白组和对照组相比,AMH蛋白在15、20日实验组高于对照组（P＜0.05）。SF-1在15、20日组显著高于对照组（P＜0.01）。GATA-4在15、20日实验组高于对照组（P＜0.05）。SOX-9实验组20日组高于对照组（P＜0.05）。结论DHEA诱导PCOS模型中,卵巢AMH分泌明显增加,可能是通过上调AMH启动子结合位点相关基因（GATA-4、SF-1、SOX-9）来完成。
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