【摘 要】
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目的:研究玄丹散结汤对子宫腺肌病在位内膜间质细胞的细胞功能及信号通路发生的影响,探讨玄丹散结汤治疗子宫腺肌病的可能分子机制。方法:1.收集子宫腺肌病患者在位内膜,体外培养原代子宫内膜间质细胞。玄丹散结汤含药血清和空白对照组含药血清分别干预其传代细胞,进行基因测序和GO、KEGG富集分析,以获取玄丹散结汤主要调控相关的细胞功能和信号通路。2.分析并验证玄丹散结汤含药血清对在位内膜IL-17/IL-1
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目的:研究玄丹散结汤对子宫腺肌病在位内膜间质细胞的细胞功能及信号通路发生的影响,探讨玄丹散结汤治疗子宫腺肌病的可能分子机制。方法:1.收集子宫腺肌病患者在位内膜,体外培养原代子宫内膜间质细胞。玄丹散结汤含药血清和空白对照组含药血清分别干预其传代细胞,进行基因测序和GO、KEGG富集分析,以获取玄丹散结汤主要调控相关的细胞功能和信号通路。2.分析并验证玄丹散结汤含药血清对在位内膜IL-17/IL-17R/Act 1信号通路细胞的影响。qRT-PCR检测IL-17信号通路（IL-17、IL-17R及Act 1）及其下游靶基因（CXCL1、CXCL2、CXCL8 及 IL-1 β）的 mRNA表达差异;Western Blot检测 IL-17 信号通路（IL-17、IL-17R及Act 1）的蛋白表达差异;Elisa验证细胞上清液中IL-17通路下游靶基因（CXCL1、CXCL2、CXCL8及IL-1β）的分子水平表达差异。结果:1.本研究子宫在位内膜间质细胞的体外细胞原代培养和传代培养成功,药物干预后可进一步进行后续研究。2.含药血清干预EuESCs后表达谱分析发现129个表达明显变化的基因（Padjust＜0.05）,其中上调基因48个,下调基因81个。GO富集分析提示变化基因富集多种细胞功能（细胞发育、细胞迁移正向调控、细胞粘附及细胞外区域等）;KEGG富集分析示,细胞-细胞因子受体、IL-17信号通路等被显著富集。3.在mRNA和蛋白水平,IL-17/IL-17R/Actl信号通路中IL-17、IL-17R的表达无明显改变（P＞0.05）,而通路中关键因子Act 1的表达明显降低（P＜0.01）;在mRNA和分子水平,下游靶基因CXCL 1、CXCL2、CXCL 8及IL-1β表达均降低（P＜0.05）,其中CXCL 1、CXCL2的降低更为明显（P＜0.01）。结论:1、玄丹散结汤含药血清可显著影响子宫腺肌病在位内膜间质细胞（EuESCs）基因表达谱;2、玄丹散结汤抑制EuESCs中IL-17通路中关键分子Act1及其下游趋化因子（CXCL1、CXCL2、CXCL8）和促炎因子 IL-1β 的表达。
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