论文部分内容阅读
心肌缺血（Myocardial ischemic）严重危及人类的生命健康,降低患者生活质量,同时增加社会和家庭的经济负担,是影响全球人口的国际公共健康问题。随着社会发展和社会老龄化现象出现,心肌缺血发病率逐年增加,且常造成心肌不可逆转的损伤,世界卫生组织数据表明2020、2019年中低、中高以及高收入国家主要死亡原因中缺血性心脏病均位于高位。近年来心脏疾病患者进行手术的需求也在增加,如何减少心血管疾病患者的手术风险以及合理选择围术期的麻醉药物成为一直以来医学研究的热点。右美托咪定（Dexmedetomidine,DEX）常用于镇静、镇痛,无呼吸抑制,是高选择性的α2-肾上腺素能受体激动剂,研究表明DEX可以通过多种信号通路起到保护心肌的作用,且在心脏外科手术中,可以减少部分患者术后心律失常的发生几率,改善预后,但过量DEX也存在降低心率的情况,对心脏的活动有一定的抑制作用,可能增加损伤,如何才能更好地发挥其对于心脏的保护作用,明确其机制及用药剂量是研究的关键。目的探讨不同剂量DEX对急性心肌缺血大鼠缺血心肌的保护作用及相关机制。方法100只健康雄性SD大鼠,随机分为5组:对照组（C组）、模型组（M组）、10μg·kg-1右美托咪定组（D10组）、25μg·kg-1右美托咪定组（D25组）、50μg·kg-1右美托咪定组（D50组）。结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型,对照组仅开胸穿线不结扎,D10组、D25组、D50组在缺血前30 min按4μg·ml-1浓度腹腔注射右美托咪定10μg·kg-1、25μg·kg-1、50μg·kg-1,M组在缺血前30 min腹腔注射生理盐水。缺血3 h末记录其血流动力学变化;检测血清中CK-MB1、LDH活性、c Tn T含量;血清中H2S含量与心肌组织中CSE活性;检测心肌组织中Trx R活性、LPO、GSH含量;采用TTC染色计算心肌梗死面积;TUNEL检测心肌细胞凋亡情况;HE染色观察心肌形态学变化;电镜下观察心肌超微结构变化;IHC检测心肌中TXNIP、TRX、NOX-4、Caspase-3、Beclin-1、LC3变化和Western blot检测心肌中TXNIP、TRX、NOX-4、Caspase-3、p-ASK1、Beclin-1、LC3、p62、p-AMPK以及p-mTOR蛋白表达。结果1与C组相比,M组大鼠缺血3h后,血流动力学指标:HR、MAP、LVDP、±dp/dtmax明显降低,LVEDP明显增加（P均＜0.01）;与M组相比,D10组缺血3h后MAP、LVDP、±dp/dtmax增加（P＜0.05,P＞0.05,P＜0.05）,LVEDP明显降低（P＜0.01）,D25组缺血3h后HR、MAP、LVDP、±dp/dtmax明显增加（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01）,LVEDP明显降低（P＜0.01）,D50组缺血3h后HR、MAP、LVDP、±dp/dtmax明显增加（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01）,LVEDP明显降低（P＜0.01）;2与C组相比,M组大鼠血清中CK-MB1、LDH活性增强,c Tn T量增加（P均＜0.01）;与M组相比,DEX三个剂量组CK-MB1、LDH活性明显降低,c Tn T含量明显减少,其中D10组（P＞0.05）、D25组（P＜0.05）、D50组（P＜0.01）;3与C组相比,M组大鼠TTC染色显示心肌梗死面积明显增加（P＜0.01）,光镜下提示心肌纤维排列紊乱,细胞水肿、溶解,电镜下观察心肌细胞超微结构,结果显示M组大鼠心肌细胞核周高度水肿,线粒体膜肿胀,嵴减少、融合甚至消失;与M组相比,DEX给药组心肌形态学损伤有所改善,心肌梗死面积明显减少（P均＜0.01）;4与C组相比,M组大鼠心肌组织中CSE活性明显减弱、血清中H2S含量明显降低（P均＜0.01）;与M组相比,DEX三个给药组H2S含量增加（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01）,D25组、D50组CSE活性明显高于M组（P均＜0.01）,而D10组CSE活性与M组相比无统计学差异（P＞0.05）;5与C组相比,M组大鼠心肌组织中GSH含量明显降低,LPO含量明显增加（P均＜0.01）;与M组相比,D10、D25、D50三个剂量组LPO含量均明显减少（P＜0.01）;D25、D50组GSH含量明显高于M组（P＜0.05,P＜0.01）,而D10组心肌组织中GSH含量与M组相比无统计学差异（P＞0.05）;6与C组相比,M组大鼠心肌组织中Trx R活性明显减弱,TRX蛋白表达明显减少,TXNIP、NOX-4、p-ASK1、Caspase-3蛋白表达明显升高,心肌细胞凋亡率增加,差异均有统计学意义（P＜0.01）。与M组相比,D10,D25,D50三个剂量组Trx R活性增强,TRX蛋白表达增多,TXNIP、NOX-4、p-ASK1、Caspase-3蛋白表达减少,心肌细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;7与C组相比,M组大鼠心肌组织中p-mTOR/mTOR表达升高,p-AMPK/AMPK表达降低,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ以及p62蛋白表达均下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与M组相比,D10,D25,D50三个剂量组p-mTOR/mTOR表达减少,p-AMPK/AMPK表达升高,Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ以及p62蛋白表达均上升,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论DEX可以通过提高内源性H2S含量,抑制TXNIP表达的同时增强Trx R活性,减少p-ASK1的表达,抑制心肌细胞凋亡,同时激活AMPK,升高p-AMPK的表达,抑制p-mTOR表达,促进心肌细胞自噬流的恢复,减轻急性心肌缺血损伤,保护心肌功能,D25、D50组对心肌的保护作用效果更佳。