【摘 要】
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目的:1通过数据挖掘的方法,对史云主任医师临床治疗卵巢储备功能减退的用药规律进行整理、归纳,总结出治疗卵巢储备功能减退的核心处方。2通过果蝇实验对核心处方进行验证并探索其作用机制。方法:1收集2015年12月至2020年12月五年间史云主任医师治疗的卵巢储备功能减退患者处方信息,进行回顾性研究。遵纳排标准录入中药处方,建立数据库。运用中医传承计算平台V3.0软件,统计药物的用药频次、常用剂量、功效
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目的:1通过数据挖掘的方法,对史云主任医师临床治疗卵巢储备功能减退的用药规律进行整理、归纳,总结出治疗卵巢储备功能减退的核心处方。2通过果蝇实验对核心处方进行验证并探索其作用机制。方法:1收集2015年12月至2020年12月五年间史云主任医师治疗的卵巢储备功能减退患者处方信息,进行回顾性研究。遵纳排标准录入中药处方,建立数据库。运用中医传承计算平台V3.0软件,统计药物的用药频次、常用剂量、功效和性味归经等性质,挖掘药物间的关联规则并进行聚类分析。2用高糖饮食建立雌性果蝇卵巢衰老模型,按照核心处方配伍并制成中药干燥固体,加入高糖培养基作为干预措施。实验组共分为三组,以公比为5设置低中高三个剂量组,中药低剂量浓度为0.02 g（生药材）/10 mL（培养基）,中药中剂量组浓度为0.1 g（生药材）/10mL（培养基）,中药高剂量组浓度为0.5 g（生药材）/10mL（培养基）。从给药第3天开始,每日定时更换培养基,观察并记录24小时内同一培养管内果蝇的产卵数目,重复7天。在实验第10天处死果蝇,摘取雌蝇卵巢,DAPI染色制片观察卵巢形态,实时荧光定量 PCR（quantitative real-time PCR,RT-qPCR）方法检验 PI3K 和 AKT的mRNA表达水平。结果:1数据挖掘结果显示,史云主任医师治疗卵巢储备功能减退的核心药物共有4味,分别是补益肝肾之菟丝子、补血活血之当归、疏肝行气之香附、养血柔肝之白芍;高频药物共10味,分别是桑寄生、杜仲、川芎、茯苓、党参、白术、炙甘草、玉竹、郁金、鸡血藤,并分别统计了以上药物的临床常用剂量。核心药对有“当归-香附”、“当归-白芍”、“香附-菟丝子”、“香附-白芍”、“当归-菟丝子”、“当归-香附-白芍”、“当归-香附-菟丝子”等。根据数据挖掘成果结合临床跟师经验,经史云主任医师指导得出核心处方为“菟丝子20g,当归10g,香附10 g,白芍15 g,桑寄生15 g,杜仲15g,川芎 10g,茯苓20g”。2运用果蝇实验进行核心处方功效验证和机制探索,实验发现:（1）采用高糖饮食饲养的模型组果蝇产卵数目较空白对照组明显下降（P＜0.001）,模型组果蝇卵巢的PI3K、AKT表达水平亦显著降低（P＜0.001）;（2）中药低、中、高剂量组果蝇产卵数目与模型组相比呈现上升趋势,但无显著差异（P＞0.05）;（3）通过RT-qPCR检测发现,中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组卵巢的PI3K、AKT表达水平较模型组均显著上升（P＜0.05）,且高剂量组的差异最为显著（P＜0.01）,说明核心处方能够上调果蝇卵巢PI3K/AKT信号通路的表达,并且随着浓度的上升,上调效果更为显著。结论:1史云主任医师临床治疗卵巢储备功能减退是在补肾的基础上注重肾肝脾同调、重视气血的调理。核心处方围绕核心药物配伍,以菟丝子、杜仲、桑寄生补益肝肾,强壮根基;茯苓补脾益气,强壮后天之本;白芍敛阴柔肝,香附疏肝调气,二者共同治肝以理气;当归补血活血,川芎活血,二者共同用于理血。全方体现了肝脾肾同治、气血同调的用药特色。2果蝇实验结果证实:（1）高糖饮食能显著降低雌性果蝇产卵数目,具有促果蝇卵巢衰老的作用;（2）核心处方对高糖诱导衰老模型果蝇的产卵数目有改善趋势,推测这一过程可能与PI3K/AKT信号通路相关,其机制还有待进一步探索。
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