【摘 要】
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目的本研究经由测定多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）病人和正常对照组血清外泌体内micro RNA-27a-3p（miR-27a-3p）的表达差异,进一步分析血清外泌体中miR-27a-3p表达与PCOS患者的相关性,有助于提高我们深入研究PCOS的发病机理和临床诊断治疗,为发现PCOS诊断标志物和治疗靶点提供新的研究思路。方法选取2020年1月～12月
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目的本研究经由测定多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）病人和正常对照组血清外泌体内micro RNA-27a-3p（miR-27a-3p）的表达差异,进一步分析血清外泌体中miR-27a-3p表达与PCOS患者的相关性,有助于提高我们深入研究PCOS的发病机理和临床诊断治疗,为发现PCOS诊断标志物和治疗靶点提供新的研究思路。方法选取2020年1月～12月在云南省大理大学第一附属医院生殖医学科门诊患者作为研究对象,收集按纳入与排除标准的30例PCOS患者作为实验组,同时将所收集的同期15位卵巢功能无异常病人归入对照组。记录患者的年龄、体重指数（body mass index,BMI）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）、雌二醇（estrogen,E2）、胰岛素（insulin,INS）、血糖（glucose,Glu）、胰岛素抵抗指数（homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR）。利用外泌体提取试剂盒对血清中的外泌体进行提取,透射电子显微镜（transmission electron microscopy,TEM）观察所提取的外泌体的外观及形态,随后采取蛋白免疫印迹实验（Western-blot,WB）鉴定膜特异性蛋白CD9、CD63的表达,然后借助实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）法对两组入组对象的血清外泌体内miR-27a-3p的表达水平展开测定,对血清外泌体内miR-27a-3p表达和PCOS病人之间的关联性展开分析。经由分析受试人员工作特征曲线ROC及曲线下面积AUC来评价血清外泌体miR-27a-3p对PCOS诊断的特异性及敏感性。结果对于临床基本资料开展统计分析的结果显示,对比PCOS组入组对象和对照组对象,在年龄、FSH值以及E2值方面,皆为P＞0.05,即皆未见明显区别,在BMI、LH、T、Glu、INS这些方面,对比两组的结果皆为P＜0.05,即皆存在明显区别。相较于对照组入组对象,实验组对象血清外泌体内miR-27a-3p的相对表达水平为明显上调表现（P＜0.01）。在PCOS组,对miR-27a-3p的表达水平与LH、T、HOMA-IR进行相关性分析发现,r值依次等于0.461、0.422、0.306。通过对ROC曲线分析显示,miR-27a-3p用于诊断多囊卵巢综合征的曲线下面积（areaunder curve,AUC）值为0.75,敏感度为80%,特异度为70%,95%置信区间为0.59-0.91。结论1.进行TEM以及WB测定的结果显示,分离自血清内的提取物与文献中对外泌体特征与形态的描述相符。2.PCOS患者体重指数、LH值、Glu值、胰岛素的水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3.miR-27a-3p于PCOS病人血清外泌体内为明显高表达表现（P＜0.01）;同时血清外泌体内miR-27a-3p的表达水平与LH、T、HOMA-IR水平均有相关性,表现出显著联系（P＜0.05）。4.血清外泌体内miR-27a-3p在对PCOS进行诊断方面具备一定应用价值。
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