研究背景及目的银屑病是一种免疫细胞及免疫因子介导的炎症性皮肤病,以表皮异常增生、炎性细胞浸润为特征。银屑病的皮损中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞浸润增加,随后激活自然杀伤细胞和T细胞,维持与独特的Th17细胞介导的病理的循环。其中IL-23/Th17轴被认为在银屑病中有着关键的作用,T细胞的活化及其对炎症因子的上调作用被认为主要影响银屑病的发生发展,并促使角质形成细胞的过度增殖和终末分化。间充质干细胞（MSCs）是一种广泛存在于多种组织中具有免疫原性低、自我更新能力强、免疫调节特性强的成体多能祖细胞,可通过直接接触、释放可溶性物质等方式,调节B细胞增殖和浆细胞分化、调节巨噬细胞极化、抑制DC成熟、抑制中性粒细胞动员、抑制NK细胞和T淋巴细胞增殖等免疫调节功能,被认为是治疗类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、克罗恩病、银屑病等多种自身免疫或炎症性疾病的一种治疗方式。有报道2例寻常型银屑病患者在接受MSCs移植治疗后疗效明显,且观察4-5年均无复发。但目前MSCs对银屑病的具体的治疗机制尚未完全清楚。Janus激酶信号转导和转录激活因子（JAK-STAT）途径是一种重要的细胞因子信号转导途径,在介导细胞增殖、分化、凋亡、免疫调节和干细胞发育等多种生物过程中有着十分的重要作用,并与自身炎症性疾病密切相关。TYK2作为JAK-STAT家族中JAK蛋白之一,它的激活参与了 Th17的活化、稳定及增殖。目前相关的临床研究表明小分子TYK2抑制剂对中重度的银屑病也有着良好的疗效。考虑MSCs可抑制CD4+T细胞向Th17细胞的分化,而TYK2的激活参与的Th17细胞的活化与增殖在银屑病免疫过程中有着关键作用,因此,我们推测MSC可能通过抑制TYK2磷酸化减轻银屑病的严重程度。本课题将通过以下实验设计探究MSCs对银屑病样皮炎小鼠的可能的治疗机制。方法:1.将6-8周龄的BALB/c雌性小鼠随机分为空白组、咪喹莫特组（IMQ组）及间充质干细胞治疗组（IMQ+MSC组）,利用咪喹莫特乳膏建立银屑病样皮炎小鼠模型,建模期间每日对小鼠皮损处拍照,并进行PSAI评分。比较MSC处理前后的皮损严重程度及脾脏大小的改善程度。2.取各组小鼠病变皮肤组织进行HE染色及组织免疫荧光染色,比较各组小鼠皮损表皮厚度及CD4+T细胞、CD11c+树突状细胞浸润程度。3.取各组小鼠病变皮肤组织进行蛋白提取,通过Western Blot技术检测总TYK2及p-TYK2的相对表达水平,对比各组小鼠总TYK2及p-TYK2的相对表达水平差异;取各组小鼠病变皮肤组织进行组织免疫荧光染色,比较各组小鼠皮损RORγT+Th17细胞浸润程度。结果:1.IMQ组小鼠比空白组小鼠的红斑、鳞屑程度明显加重,脾脏大小明显增加,PASI评分随着建模的时间逐渐增加;IMQ+MSC组小鼠在予MSC处理后较IMQ组小鼠的红斑、鳞屑的严重程度下降,脾脏变小及PASI评分下降。2.IMQ组小鼠表皮厚度相较于空白组明显增厚,CD4+T细胞及CD11c+树突状细胞浸润显著增加;IMQ+MSC组小鼠表皮厚度较IMQ组的明显下降,CD4+T细胞及CD1 1c+树突状细胞浸润程度明显减少。3.Western Blot结果提示各组总TYK2水平未见明显差异,而IMQ组的TYK2的磷酸化水平较之空白组升高,IMQ+MSC组的TYK2的磷酸化水平下降;IMQ组的RORγ T+Th17细胞浸润增加,IMQ+MSC组的RORγ T+Th17细胞浸润减少。结论:MSC可通过抑制TYK2磷酸化缓解银屑病样皮炎小鼠的皮损病变。