目的:盆底肌（pelvic floor muscle,PFM）是盆腔器官支持系统的关键结构,主要由肛提肌组成,其结构异常和功能障碍可引起临床病理改变,导致盆底功能障碍性疾病（pelvic floor dysfunction,PFD）,严重影响患者的正常工作生活和身心健康。我国成年女性PFD患病率高达20%～40%,不同年龄段存在一定差异,并随着人口老年化的加剧,女性PFD患者明显增加。PFD的病因尚不完全清楚,目前认为是一种多因素疾病,如阴道分娩所致产伤、肥胖和盆腔手术史等。研究表明,阴道分娩、肥胖等因素所导致的盆底肌损伤及功能障碍在女性PFD的发生发展具有重要作用。铁死亡（ferroptosis）是一种铁依赖性的调节性细胞死亡,与铁代谢异常及脂质过氧化等密切相关。其分子机制、形态学变化及生化改变等方面与其他细胞死亡方式有所不同,如凋亡、坏死等,主要以产生脂质过氧化物并损伤细胞膜结构为主要机制,从而诱发细胞死亡,其是否参与到机械力所致的盆底肌组织损伤尚未可知。因此,本文研究铁死亡和机械力所致盆底肌损伤的相关性,旨在为盆底肌损伤相关的PFD治疗提供新的思路。方法:使用四点弯曲细胞力学加载仪在不同损伤参数下对C2C12细胞进行机械力损伤后,CCK8试剂盒测定细胞活性,选定损伤参数用于后续实验。使用铁死亡抑制剂ferrostatin-1（Fer-1）处理细胞并进行机械力损伤细胞,DCFH-DA流式测定活性氧（reactive oxygen species,ROS）,丙二醛（malondialdehyde,MDA）试剂盒测定脂质过氧化,铁离子比色法测定试剂盒测定细胞内铁离子含量,Western blot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase4,GPX4）、15脂氧合酶1（15 lipoxygenase 1,15LOX-1）的表达,以确定发生铁死亡。使用棕榈酸（Palmitic acid,PA）构建高脂C2C12细胞模型,Fer-1处理细胞并机械力损伤后检测ROS、MDA、铁离子、GPX4、15LOX-1等指标,从而确定是否发生铁死亡并与非高脂C2C12损伤细胞进行比较。阴道扩张法模拟产伤在普通饮食和高脂饮食小鼠中构建盆底肌损伤模型,检测小鼠盆底肌MDA含量,GPX4、15Ll OX-1蛋白的表达,透射电镜观察盆底肌肌细胞线粒体形态,进一步明确铁死亡在盆底肌机械力损伤中的作用。结果:我们的体外实验结果显示,机械拉伸可以诱导小鼠C2C12细胞的氧化损伤,导致C2C12细胞内铁离子蓄积,脂质过氧化产物生成增多,引发铁死亡。此外,GPX4蛋白表达降低,15LOX-1蛋白表达升高,均揭示了机械力损伤诱发C2C12细胞铁死亡,并在PA处理的细胞中更为明显。此外,铁死亡抑制剂Fer-1可有效抑制机械力损伤诱发的铁死亡,保护细胞。更重要的是,体内实验发现,阴道扩张法损伤小鼠盆底肌后,盆底肌肌细胞线粒体收缩、线粒体嵴模糊,与铁死亡的线粒体形态改变一致,GPX4和15LOX-1的变化与细胞中观察到的相一致。结论:综上所述,本研究结果表明盆底肌机械力损伤与铁死亡密切相关,机械力损伤诱导盆底肌活性氧增加、脂质过氧化以及抗脂质过氧化酶GPX4表达下降,导致发生铁死亡,且机械力损伤导致的铁死亡在高脂小鼠和C2C12细胞中更为显著。