【摘 要】
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目的:虫草素作为蛹虫草中一种活性物质广受人们关注,具有广泛的药理学功效,由于它的稀有性和特殊性,在自然界中获得虫草素具有一定的困难,目前虫草素的主要来源是生物合成法,本研究利用液体深层发酵方式,以虫草素产量为指标,探究了培养方式、添加物质对虫草素产量的影响,筛选大孔吸附树脂纯化虫草素,以最大程度地提高虫草素产量,为虫草素的广泛应用提供了实验依据和参考。方法:本研究考察了液体深层发酵培养方式对虫草素
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目的:虫草素作为蛹虫草中一种活性物质广受人们关注,具有广泛的药理学功效,由于它的稀有性和特殊性,在自然界中获得虫草素具有一定的困难,目前虫草素的主要来源是生物合成法,本研究利用液体深层发酵方式,以虫草素产量为指标,探究了培养方式、添加物质对虫草素产量的影响,筛选大孔吸附树脂纯化虫草素,以最大程度地提高虫草素产量,为虫草素的广泛应用提供了实验依据和参考。方法:本研究考察了液体深层发酵培养方式对虫草素合成的影响;对添加物质种类进行筛选,并通过响应面优化实验,对筛选出的添加物质配比进行优化;并利用大孔吸附树脂对发酵产物进行纯化处理,筛选出最适合虫草素吸附的树脂,并对上样体积、上样时间、洗脱液浓度、洗脱液用量进行考察,以最大程度地提高虫草素产量。结果:对蛹虫草液体深层发酵培养方式进行探究,研究发现最有利于虫草素积累的培养方式为避光静置培养21d;从8种添加物质中筛选出腺嘌呤、甘氨酸、腺苷、Mn SO4的添加对于虫草素的积累具有一定的促进作用,运用响应面实验优化添加物配比,最终得到最佳添加量配比为腺嘌呤3.17g/L,甘氨酸7.08g/L,腺苷5.17g/L,Mn SO40.50g/L,在此条件下得到发酵液中虫草素浓度为4063.76ug/m L;通过比较8种大孔吸附树脂的吸附率、解析率,优选出H103大孔树脂作为蛹虫草液体发酵液中虫草素纯化用的树脂,最终得虫草素纯度为55.22%。结论:综上所述,本实验提供了一种添加生长因子、前体等添加物质提高虫草素产量的方法,并系统性的考察了大孔吸附树脂纯化虫草素的过程,使虫草素纯度达到五类新药标准,为研发虫草素新产品提供了实验基础和依据。
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