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目的:探讨脊髓水平TNF-α在小鼠骨癌痛发生中的作用及其分子机制。
方法:72只C3H/He小鼠随机分为肿瘤组（T组）、假手术组（S组）和依那西普预处理组（E组，etanercept 组）（n=32），每组再次分为术后7d、10d、14d组，即T7（肿瘤细胞接种后7 d）、T10（接种后10 d)、T14（接种后14 d）、S7（假手术后7 d）、S10（假手术后10 d）、S14（假手术后14 d）、E7（etanercept腹腔给药预处理+肿瘤细胞接种后7 d）、E10（etanercept预处理+肿瘤细胞接种后10 d）和E14（etanercept预处理+肿瘤细胞接种后14 d）（n=9）。将含105个纤维肉瘤NCTC 2472细胞的最小必需培养基（α-MEM）注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内，制作骨癌痛模型，假手术组注入不含肿瘤细胞的α-MEM；依那西普预处理组为肿瘤细胞接种前3d、接种前、接种后3d、6d共四次，每次腹腔内注射100μg容积为0.5ml的依那西普。于接种前，接种后3 d、5 d、7 d、10 d、14 d检测痛行为学指标：机械痛缩足阈值（PWMT）、热痛缩足潜伏期（PWTL）和自发性抬足次数。按照分组在相应时间点处死小鼠，用RT-PCR的方法检测脊髓腰膨大TNF-α的mRNA水平。
结果:
（1）小鼠在接种后3 d都出现痛行为学改变，无统计学意义；接种后5 d，所有小鼠的痛行为学指标基本恢复到接种前水平。术后10 d，肿瘤组和依那西普预处理组小鼠右后足PWMT随着疼痛的发展逐渐降低，肿瘤小鼠接种肢体PWMT降低（1.00±0.27）g，低于接种前水平（1.78±0.31）g和假手术组水平（1.85±0.27）g,在整个观察期内，E组的PWMT和T组有相似的减少趋势，但在相对应的时间点上，仍高于S组。术后14d，依那西普预处理组的PWMT (0.95±0.25) g 较肿瘤组(0.42±0.07) g高，却低于对照组(1.92±0.21)g；早在接种后5天，肿瘤鼠的PWTL（17.7±0.9）s与对照组（18.8±0.8）比较有轻微的改变，术后14 d降低更加显著（10.4±0.9）s。依那西普将热痛敏出现的时间推迟到了术后7天，并部分缓解了肿瘤鼠的热痛觉过敏,术后14 d，E14组PWTL（16.90±0.5）s高于T14组（10.4±0.9）s，却又低于S14组（18.80±0.7）s；在整个观察期内，对照组自发性抬足次数改变不明显，但肿瘤鼠于术后7天就表现出较对照组和术前抬足次数显著增多（4.13±0.83:1.13±0.64:1.13±0.64），呈现递增趋势，并持续整个观察期。术后14天，依那西普预处理小鼠自发性抬足次数（4.75±1.66）明显少于肿瘤组（10.63±1.41），但多于对照组（0.88±0.35）。
（2）假手术组脊髓水平TNF-α mRNA的表达随时间呈现降低趋势，于术后10天达到低谷，持续整个观察期；细胞接种后7d，T组脊髓水平TNF-α mRNA的表达（1.03±0.62）较S7（0.91±0.47）增加，并在整个观察期内则呈现增加趋势，T14（1.36±0.60）比T7（1.03±0.62）表达量多；依那西普组TNF-α mRNA的表达较相应时间点的肿瘤组减少，但仍高于假手术组，术后14d，E14的表达（1.03±0.33）较T14组（1.35±0.60）少。
结论:脊髓水平的TNF-α参与了癌性疼痛早期和或晚期的发生和维持。TNF-α的阻断剂依那西普预处理能有效减轻小鼠骨癌痛行为。