白花丹素体内外抗Lewis肺癌的效果及机制研究

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目的:研究白花丹素(Plumbagin,PL)对Lewis肺癌的抑制作用。方法:1、CCK-8检测白花丹素对Lewis肺癌(Lewis lung carc,LLC)细胞的增殖影响;2、流式细胞仪检测Lewis肺癌细胞的凋亡率;3、qRT-PCR检测Lewis肺癌细胞内VEGF mRNA表达水平;4、Western blot检测Lewis肺癌细胞内Bcl-2和VEGF蛋白的表达水平;5、使用30只C57BL/6近交系小鼠,建立Lewis肺癌小鼠模型;造模后,分为5组,每组6只,分别使用生理盐水、白花丹素(分小、中、大3个剂量组)及环磷酰胺(CTX)作用于动物模型;观察各组肿瘤体积大小,称取瘤重,并计算抑瘤率,应用免疫组化法检测肿瘤组织VEGF表达情况。结果:1、CCK-8结果显示白花丹素对Lewis肺癌细胞有明显的抑制作用,各药物浓度组与对照组比较(P<0.05);2、当浓度为2.5μmol/L,5μmol/L和10μmol/L的白花丹素干扰Lewis肺癌细胞24h,细胞的凋亡率为(4.84±0.54)%、(10.37±1.15)%、(20.27±2.51)%,与空白对照组(2.45±1.09)%比较差异有统计学意义(P<0.05);3、白花丹素干扰Lewis肺癌细胞后VEGF mRNA水平与对照组比较明显下调(P<0.05);4、Western bolt结果显示不同浓度白花丹素(2.5、5、10μmol/L)对Lewis肺癌细胞中Bcl-2和VEGF蛋白表达与对照组相比(P<0.05),各药物组间比较(P<0.05);5、在瘤株接种的第10、13、16、19天,白花丹素小、中、大剂量组及CTX组的肿瘤体积与对照组比较(P<0.05),白花丹素各剂量组之间肿瘤体积比较(P<0.05);白花丹素(小、中、大剂量组)及CTX组对荷Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长抑制率分别为14.48%、31.47%、48.27%、57.76%,各组之间瘤重的比较(F=33.253,P=0.000),白花丹素各剂量组之间瘤重比较(P<0.05);对照组、白花丹素(小、中、大剂量组)及CTX组肿瘤组织中VEGF蛋白表达水平比较采用单因素方差分析(F=153.52,P=0.000),各药物组与对照组比较(P<0.05)。结论:⑴体外:白花丹素抑制Lewis肺癌细胞的增殖,下调Bcl-2、VEGF蛋白的表达,并诱导Lewis肺癌细胞凋亡。⑵体内:白花丹素下调Lewis肺癌肿瘤组织内VEGF蛋白表达,并延缓肿瘤的生长,结合体外实验证实白花丹素对Lewis肺癌具有抑制作用。
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