【摘 要】
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目的:研究氧糖剥夺/恢复（oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R）对A549肺泡上皮细胞凋亡与焦亡的作用,并探讨二者之间的相互影响。方法:培养人肺泡A549细胞株,建立氧糖剥夺/恢复细胞损伤模型,分为对照组（control）,氧糖剥夺/恢复组（OGD/R）,氧糖剥夺/恢复复合焦亡抑制剂组（OGD/R+VX-765）,氧糖剥夺/恢复复合凋亡抑制剂组（OGD
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目的:研究氧糖剥夺/恢复（oxygen-glucose deprivation/recovery,OGD/R）对A549肺泡上皮细胞凋亡与焦亡的作用,并探讨二者之间的相互影响。方法:培养人肺泡A549细胞株,建立氧糖剥夺/恢复细胞损伤模型,分为对照组（control）,氧糖剥夺/恢复组（OGD/R）,氧糖剥夺/恢复复合焦亡抑制剂组（OGD/R+VX-765）,氧糖剥夺/恢复复合凋亡抑制剂组（OGD/R+FMK）,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用ELISA法测定培养细胞上清中焦亡标志物IL-1β、IL-18水平,采用RT-q PCR和Western-blot法测定细胞凋亡和焦亡关键分子的mRNA与蛋白质表达水平。结果:OGD/R组A549细胞凋亡率较对照组升高（10.51±0.47与4.36±0.46,P＜0.05）,使用焦亡抑制剂后,OGD/R+VX-765组细胞凋亡率为8.92±0.33,较OGD/R组降低（P＜0.05）,但VX-765对细胞凋亡关键分子Caspase-3、BAX和BCL2的mRNA和蛋白相对表达量无显著影响（P＞0.05）;OGD/R组培养上清中焦亡标志物IL-1β、IL-18分别为17.35±0.44ng/L和18.06±1.7ng/L,较对照组升高（7.80±0.80ng/L、7.99±0.11ng/L）,差异具有统计学意义（P＜0.05）。使用凋亡抑制剂后,OGD/R+FMK组IL-1β、IL-18水平分别为4.72±0.59ng/L和10.24±1.41ng/L,较OGD/R组降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,但凋亡抑制剂对焦亡关键分子NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD的mRNA和蛋白相对表达量无显著影响（P＞0.05）;OGD/R组促凋亡分子BID的mRNA和蛋白相对表达量分别为1.74±0.14和1.28±0.11,较对照组升高,差异有统计学意义（P＜0.05）,OGD/R+VX-765组分别为1.12±0.18和1.01±0.10,较OGD/R组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;OGD/R组焦亡相关分子GSDME的mRNA和蛋白表达升高,分别为1.35±0.10和1.20±0.06,差异具有统计学意义（P＜0.05）,OGD/R+FMK组为0.94±0.05和0.52±0.03,较OGD/R组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:OGD/R可同时引发A549细胞发生焦亡与凋亡,且细胞焦亡与凋亡存在共享信号通路;两种抑制剂均可同时抑制OGD/R引起的A549细胞焦亡与凋亡。
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