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生命体系中的锌除了大部分作为蛋白和酶的金属中心处于结合状态外,体内还存在少量主要富集于神经系统的游离锌,可作为传统的神经递质和突出后神经元跨膜信号的载体。这部分自由锌离子在细胞内外都发挥信使作用,如抑制GABAergic的神经传递,调节蛋白酶C的信号路径。另外,锌代谢平衡还与胰岛素分泌、细胞凋亡、神经退行性紊乱等密切相关。阐明锌离子的摄取、转运、贮存、释放过程有利于理解相关的生命过程和相关疾病的诊疗。因此对体内锌离子时空分布状态的实时跟踪与检测已成为研究的热门领域之一。目前锌离子荧光造影技术逐渐受到重视,寻找具有可见光激发和不同锌离子结合能力的新型荧光探针则是该技术的关键。
本研究利用荧光性质已经表征过的三种新型锌离子荧光探针DANQUIN、QB1、NBDA用于HeLa细胞、PC-12细胞、C6细胞、皮层神经元细胞和小鼠海马组织中的锌离子进行染色,并利用激光共聚焦荧光显微镜获得了共聚焦造影图片。结果表明,可见光激发的NBDA可以成为一种能够有效的探测细胞和组织内自由锌离子的荧光探针。通过对不同分裂周期HeLa细胞的造影研究发现,锌离子的分布发生明显变化,表明锌离子可能参与了细胞的增殖和分化过程,进一步的研究还在进行中。利用NBDA对海马组织切片进行锌离子造影发现,大量的锌离子存在于海马的CA3区,与文献报道的结果一致。NBDA对神经元细胞的锌离子造影发现无论内源锌离子还是外源锌离子都聚集在靠近轴突一边的胞质中,这可能与神经元中锌离子随时等待参与神经信号的转导有关。这些研究表明NBDA有可能在锌离子相关的神经化学研究中发挥重要作用。