背景:伴随着社会人口老龄化程度的加剧,神经退行性疾病的发病率逐年上升,例如阿尔兹海默症和帕金森病等,影响社会发展和家庭幸福,因此近年来愈发受到研究人员的关注。许多研究证实,这一类疾病的发生与神经元内的铁超载和氧化应激密切相关,在几种神经退行性疾病中观察到神经元铁积累。在皮质、小脑、海马、基底节和杏仁核的小胶质细胞和星形胶质细胞中,组织化学检测到的铁沉积一般随年龄增加。脑铁水平过高会引起脂质氧化水平升高进而造成神经细胞损伤甚至死亡的现象——被学者们命名为铁死亡。铁死亡在神经退行性疾病的发病机制中起主导作用。右美托咪定作为高选择性α2肾上腺素能受体激动剂,能改善神经退行性疾病和脑外伤中的氧化应激水平的异常增高,常常被用作基础实验中的保护药物。小鼠海马神经元作为中枢神经执行认知功能的神经元易受到应激刺激——尤其是铁离子刺激,诱发氧化应激引起铁死亡,导致神经元损伤。目的:本研究经过FAC诱导铁超载毒性促成铁死亡,探讨右美托咪定对FAC诱导的HT22细胞铁超载毒性的保护作用及相关机制。方法:按常规细胞培养标准,在37℃,5%CO2培养箱中培养HT22细胞,按1:3传代12小时后细胞贴壁80%-90%的密度后进行试验。用右美托咪定预处理HT22细胞2小时,使用125μmol·L-1FAC处理24小时,随后观察HT22细胞形态、细胞增殖存活率、细胞内活性氧产生情况、细胞内脂质过氧化发生情况、细胞内亚铁离子改变情况、细胞内超微结构的损伤程度以及铁死亡特异性标记物PTGS2和ACSL4转录水平的改变情况。使用m TOR双抑制剂AZD8055处理HT22细胞,下调m TOR表达,使用125μmol·L-1FAC处理24小时,之后检测p-m TOR、TFR1蛋白表达水平。使用蛋白印迹检测PTGS2、ACSL4、p-m TOR、TFR1和Fpn蛋白水平。结果:右美托咪定组与FAC组相比较,细胞存活率显著增加,引起的细胞内亚铁离子减少、ROS水平和脂质氧化水平明显降低,铁死亡标志物PTGS2和ACSL4蛋白和转录水平表达显著下降,采用AZD8055抑制后,使HT22细胞中的m TOR表达水平下调,使用Western blotting检测该信号通路下游蛋白TFR1的表达水平,AZD8055处理的细胞中,TFR1蛋白水平明显上调,表明TFR1是m TOR的下游位点;使用右美托咪定处理细胞后,检测TFR1、Ferrtin和Fpn的蛋白表达量,相较于FAC组Ferrtin和Fpn表达上调,TFR1表达降低。结论:右美托咪定可以抑制铁超载引起的HT22细胞神经毒性,较好地抑制铁超载引起的HT22细胞中ROS、脂质氧化水平和亚铁离子的聚集,使铁死亡特异性标志物PTGS2和ACSL4表达下调,抑制铁超载引起的铁死亡,这一机制可能是通过调节m TOR-TFR1信号通路实现的。