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目的:基于“神经血管耦合机制”,利用功能近红外光谱成像技术（f NIRs）检测评估失眠大鼠关键脑区血氧代谢和神经功能改变;进一步揭示和探讨“疏肝调神”针法对失眠大鼠模型关键脑区异常激活特征和功能重构的影响,初步阐明针刺干预失眠的脑功能调节机制,为针刺干预失眠的效应机制和应用研究提供依据。方法:SPF级2～3月龄健康雄性Wistar大鼠60只,适应性饲养7天,随机分为空白组10只、造模组50只。造模组采用夹尾刺激+腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）混悬液复制肝郁型失眠大鼠模型;利用戊巴比妥钠睡眠实验监测比较空白组、造模组大鼠睡眠潜伏期（SL）和睡眠持续时间（ST）改变,评价失眠模型复制情况;利用旷场实验、高架十字迷宫实验评价肝郁模型复制情况。模型复制16天后,将模型复制成功的大鼠,随机分为模型组、抓取组、西药组、针刺组、假针刺组,每组10只。抓取组采用和两治疗组相同方式抓取;西药组予以艾司唑仑溶液灌胃治疗;针刺组取“百会”“内关”“神门”“太冲”进行治疗,每穴操作为1min,1次/d,连续治疗7d;假针刺组取近躯干尾根、近躯干尾根1-2cm、尾中1/3、尾尖四个非经非穴处治疗。治疗结束后,在明暗刺激两种情况下,采用f NIRs检测各组大鼠相关脑区Oxy-Hb、Deoxy-Hb、Total-Hb浓度变化,从8个光源-12个探测器（Source-Detector,S-D）中筛选出具有统计学意义的通道组合,根据光源-探测器覆盖大脑皮层的位置,参考《大鼠脑立体定位图谱》,初步确定失眠关键脑区（前期预实验发现有灯光刺激下6S-8D和7S-9D为失眠关键通道,其所对应的脑区分别为前额叶和枕叶;暗刺激下为7S-7D通道,对应脑区为枕叶）;并通过全脑血氧水平的绝对值构建大脑皮层血流动力学图谱,参考《大鼠脑立体定位图谱》和分析软件matlab平面图对照,通过对比分析,进一步评估确定失眠关键脑区。并探讨针刺干预对失眠大鼠相关脑区血氧代谢水平的影响,从血氧响应及其表征的脑功能动态成像角度,初步揭示“疏肝调神”针法干预失眠的脑功能机制。结果1各组大鼠行为学检测结果1.1一般情况比较与空白组相比,模型组大鼠在造模7天后精神萎靡,活动明显减少,毛色暗淡,修饰行为增多,对外界刺激呈现高度警惕状态;造模16天后,睡眠持续时间减少,对外界刺激敏感度增高,疲乏无力,喜静,毛发干枯杂乱、无光泽,爪甲偏红等明显的肝郁失眠相关症状;治疗7天后,两治疗组睡眠持续时间增加,体重明显增加,饮食饮水量及活动渐趋正常,毛发逐渐出现光泽。1.2体重比较与空白组相比,模型组大鼠体重增幅减缓（P＜0.01）;模型组与抓取组体重增幅无统计学差异（P＞0.05）;与抓取组相比,西药组、针刺组体重增幅较快（P＜0.01）;而西药组与针刺组无统计学差异（P＞0.05）;与针刺组比较,假针刺组体重增幅显著减缓（P＜0.01）。1.3戊巴比妥钠睡眠实验结果比较与空白组相比,模型组大鼠SL明显延长,ST明显缩短（P＜0.01）;模型组与抓取组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与抓取组相比,针刺组、西药组SL明显缩短,ST明显延长（P＜0.01）;西药组与针刺组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与针刺组相比,假针刺组SL明显延长,ST明显缩短（P＜0.01）。1.4高架十字迷宫实验结果比较与空白组相比,模型组大鼠OE%、OT%数值明显降低（P＜0.01）;模型组与抓取组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与模型组相比,西药组、针刺组OE%、OT%数值明显升高（P＜0.01）;与西药组相比,针刺组OE%、OT%数值升高更为显著（P＜0.05）;与针刺组比较,假针刺组OE%、OT%数值降低（P＜0.01）。1.5旷场实验结果比较与空白组相比,模型组大鼠旷场实验中直立次数、水平跨格次数、中央格得分明显降低,修饰次数明显增多（P＜0.01）;与模型组相比,抓取组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与抓取组相比,西药组、针刺组直立次数、水平跨格次数、中央格得分明显增多,修饰次数明显减少（P＜0.01,P＜0.05）;针刺组与西药组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与针刺组相比,假针刺直立次数、水平跨格次数、中央格得分较低,修饰次数较高（P＜0.01）。2各组大鼠大脑皮层f NIRs检测结果2.1灯光刺激下各组大鼠大脑皮层f NIRs检测结果与空白组比较,模型组大鼠前额叶和枕叶Oxy-Hb、Total-Hb浓度明显升高,Deoxy-Hb浓度明显降低（P＜0.01）;与模型组相比,抓取组以上指标无明显差异（P＞0.05）;与抓取组相比,西药组、针刺组Oxy-Hb、Total-Hb浓度明显降低,Deoxy-Hb浓度明显升高（P＜0.01）;针刺组与西药组相比以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与针刺组相比,假针刺组Oxy-Hb、Total-Hb浓度较高,Deoxy-Hb浓度较低（P＜0.01）。2.2暗刺激下各组大鼠大脑皮层f NIRs检测结果与空白组比较,模型组大鼠枕叶Oxy-Hb、Total-Hb浓度明显升高,Deoxy-Hb浓度明显降低（P＜0.01）;与模型组相比,抓取组以上指标无差异（P＞0.05）;与抓取组相比,西药组、针刺组Oxy-Hb、Total-Hb浓度均明显降低,Deoxy-Hb浓度均明显升高（P＜0.01）;针刺组与西药组以上指标无统计学差异（P＞0.05）;与针刺组相比,假针刺组Oxy-Hb、Total-Hb浓度升高,Deoxy-Hb浓度降低（P＜0.01）。比较2.1、2.2f NIRs检测结果,与暗刺激时相比,灯光刺激除了激活前额叶外,还激活枕叶,表明灯光刺激可显著激活视觉中枢关键脑区枕叶的活动。结论（1）肝郁型失眠大鼠总睡眠时间明显缩短,伴有情绪—学习等认知功能下降;针刺可显著改善上述症状。（2）肝郁型失眠大鼠失眠关键脑区功能出现异常激活和响应模式。无灯光刺激时,失眠大鼠异常激活脑区以前额叶为主,表明前额叶为失眠病变响应的关键脑区;有灯光刺激时,失眠大鼠异常激活脑区以前额叶和枕叶改变为主,表明视觉刺激可显著激活视觉关键脑区枕叶功能。（3）针刺和艾司唑仑均可明显改善失眠大鼠情绪—学习等认知功能,但针刺对调节失眠引起的焦虑、抑郁情绪较艾司唑仑疗效更显著;其机制可能与通过调节前额叶、枕叶血氧代谢紊乱,神经元功能异常损害有关,这为“疏肝调神”针法有效干预肝郁型失眠提供了脑功能机制和依据。