基于VDS对张掖地区奶牛子宫内膜炎流行病学调查、阴道群菌分析及临床治疗研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cmccetehi
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子宮内膜炎(Endometritis)是影响奶牛养殖业健康发展的主要生殖系统疾病之一,可导致奶牛怀孕率下降,配种次数增加、空怀期延长、妊娠风险增加、产奶量下降,严重者则造成奶牛繁殖力丧失从而增加淘汰率,影响奶牛产业的健康发展。该病在我国的发病率呈上升趋势,并呈现出地域差异,流行情况与病原微生物感染、自身激素水平、继发因素、卫生环境、饲养管理等因素有关。阴道作为奶牛生殖系统重要的微生态区系,对阻止病原菌入侵子宫起到重要的安全屏障作用,但我们对患病奶牛产后不同时期阴道内的菌群结构动态变化知之甚少。普遍认为细菌是引起奶牛子宫内膜炎的主要原因,临床上常用抗生素抑制或消除子宫病原菌,但大量使用抗生素易引起细菌耐药性和生鲜乳中药物残留,不利于生物安全和食品安全。因此,调查奶牛子宫内膜炎地域性流行情况,研究患病奶牛产后不同时期的阴道菌群构成以及筛选轮换药物非常有必要性,为综合防治该病提供技术支撑和科学参考。本研究内容主要分为以下三个部分。第一部分:奶牛子宫内膜炎的流行病学调查。采用基于阴道分泌物评价系统(Vaginal Discharge Score Grading System,VDS)的内窥镜诊断技术,调查803头产后26±3 d奶牛临床子宫内膜炎(Clinical Endometritis,CE)的发病情况,分析产犊季节、胎次、体况等继发因素对奶牛临床子宫内膜炎的影响。803头奶牛临床子宫内膜炎的发病率为33%,其中轻度子宫内膜炎(VDS 1)为12.9%,中度子宫内膜炎(VDS 2)为10.8%,重度子宫内膜炎(VDS 3)为9.3%。全年6~8月、12~1月发病率高(P<0.05);经产奶牛临床子宫内膜炎的发病率是初产奶牛的1.765倍(P<0.001);体况对奶牛子宫内膜炎没有影响(P>0.05)。第二部分:患子宫内膜炎奶牛产后不同时期的阴道菌群分析。采集39头产后14 d健康奶牛的阴道分泌物(VDS 0)和产后21 d、28 d、35 d、42 d患子宫内膜炎奶牛的阴道分泌物(VDS 2-3),采用16S r DNA高通量测序技术(Illumina Hi Seq),测定产后14 d健康奶牛和产后21 d、28 d、35 d、42 d不同时期的患子宫内膜炎奶牛阴道内微生物16S r DNA V4区序列,比较健康奶牛和产后不同时期患病奶牛阴道内菌群群落结构和多样性,分析其与子宫内膜炎发生的相关性。共鉴定出18个已知菌门(Phylum)、231个已知菌属(Genus)。产后14 d健康奶牛阴道内菌群与产后21 d、28 d、35 d、42 d患子宫内膜炎奶牛的阴道内菌群构成呈多样性,但相似性存在差异。厚壁菌门(Firmicutes)为产后14 d健康奶牛阴道内的优势菌门,链球菌属(Streptococcus)是健康奶牛阴道内的优势菌属;拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)为产后21 d、28d、35 d、42 d患子宫内膜炎奶牛阴道内的共有优势菌门,拟杆菌属(Bacteroides)为患病奶牛产后不同时期的主要菌属。第三部分:高渗葡萄糖溶液治疗奶牛子宫内膜炎的临床效果评估。经VDS系统诊断后,对产后26±3 d的45头患中度子宫内膜炎(VDS 2)奶牛和38头患重度子宫内膜炎(VDS 3)奶牛宫内灌注200 ml 50%葡萄糖溶液进行治疗,评估其临床治疗效果和治疗后首次人工授精天数、首次人工授精怀孕率、空怀期天数、产后200 d怀孕率、怀孕授精次数等繁殖性能。治疗14天后,VDS 2和VDS 3治愈率分别为73.3%和71.1%,均高于未治疗奶牛(P<0.05),治疗效果明显;首次人工授精怀孕率、产后200 d怀孕率、空怀天数等繁殖性能明显改善,均高于未治疗奶牛(P<0.05),接近于健康奶牛(VDS 0)的繁殖性能。
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