【摘 要】
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枸骨为常绿灌木或小乔木,广泛分布于华东地区。枸骨果为枸骨的果实,《中国植物志》记载枸骨果可入药,具有治疗咳嗽、腹泻、关节酸疼的功效。枸骨果的多糖含量十分丰富,然而目前关于枸骨果多糖研究十分匮乏。为了丰富枸骨果的研究内容,提高枸骨果的应用价值,本论文以枸骨果为实验原料,对其多糖提取纯化工艺、结构特征、抗炎及抗氧化活性进行研究,主要结果如下:(1)利用超声辅助技术提取枸骨果多糖,单因素试验和Desig
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枸骨为常绿灌木或小乔木,广泛分布于华东地区。枸骨果为枸骨的果实,《中国植物志》记载枸骨果可入药,具有治疗咳嗽、腹泻、关节酸疼的功效。枸骨果的多糖含量十分丰富,然而目前关于枸骨果多糖研究十分匮乏。为了丰富枸骨果的研究内容,提高枸骨果的应用价值,本论文以枸骨果为实验原料,对其多糖提取纯化工艺、结构特征、抗炎及抗氧化活性进行研究,主要结果如下:(1)利用超声辅助技术提取枸骨果多糖,单因素试验和Design Expert软件优化确定超声时间53 min、超声温度63℃和液料比26 m L/g为最佳提取条件,按照此条件进行验证试验,得率为2.36%,结果与预测值近似,说明方法可行。(2)粗多糖经过DEAE-52和Sephadex G-100柱纯化得到一种均一多糖(LCFP-3)。通过化学方法测得总糖含量为90.31%,蛋白质含量为0.246%。利用高效阴离子色谱法(HPAEC)、扫描电子显微镜(SEM)、气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)傅里叶变换红外(FT-IR)和核磁共振(NMR)对其结构特征进行分析。HPAEC结果表明多糖含有半乳糖(31.92%)、阿拉伯糖(25.87%)、半乳糖醛酸(23.35%)、鼠李糖(6.43%)、葡萄糖(6.26%)、甘露糖(3.69%)和木糖(2.48%)。LCFP-3数均分子量Mw为41.199 KDa。通过对LCFP-3进行FT-IR、NMR及甲基化分析,结果表明LCFP-3主要有8种糖残基Terminal-Araf-、4-Arap-、Terminal-Gal-、3,5-Araf-、2,4-Arap-、3-Galp、6-Galp-、3,6-Glcp-构成。(3)LCFP-3对LPS诱导的RAW246.7细胞具有剂量依赖性保护作用,并显著抑制LPS诱导巨噬细胞产生NO,表明LCFP-3具有抗炎活性。LCFP-3在质量浓度为50 mg/m L时对DPPH自由基的清除率达到79.0%,IC50为14.929 mg/m L,同时,在3~25 mg/m L范围内该多糖的还原力与质量浓度存在良好的量效关系,并与DPPH自由基清除率具有良好相关性,证实了枸骨果多糖具有良好抗氧化活性,可为其进一步开发提供实验依据。
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