背景与目的：创伤性颅脑损伤（Traumatic brain injury, TBI）是严重威胁人类健康与生命的常见疾病之一，尤其是重度TBI，死亡率和致残率均极高。TBI已成为国内外医学界急需解决的社会性问题。由于现代化进程逐渐加快，交通工具日益增多，建筑事业飞速发展，运动损伤、意外事故以及自然灾害等因素的逐渐增加，TBI有增多之势，危害突出，已成为严重的社会问题。临床医疗水平以及基础试验研究的日益提高，使颅脑损伤的抢救与治疗有了很大的进展，死亡率明显下降，但其发病后的高致残率仍然是困扰神经外科的突出问题。过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite，ONOO~-）是一氧化氮（nitric oxide, NO）的衍生物，由NO与超氧阴离子(superoxide anion, O2-)反应而成。ONOO~-不是自由基，却具有很强的氧化能力。许多研究发现，ONOO~-可能是NO在体内导致细胞、组织损伤的主要环节。TBI后，NO与O2-的生成明显增多，从而生成大量的ONOO~-。由于ONOO~-的半衰期极短，其生成的检测非常困难。目前，用于检测生物反应体系中，ONOO~-的生成方法，主要有两类：直接法和间接法。本实验采用间接法，通过检测ONOO~-的标志物—硝基酪氨酸（nitrotyrosine，NT），间接反应ONOO~-的生成量。ONOO~-可以通过多种途径，对TBI后神经元的继发性损伤产生重要的影响。因此，加强对ONOO~-的生成途径和病理生理作用的研究，对预防TBI后继发性神经元损害，以及神经元的修复和再生具有重要的意义。方法：本实验应用液压冲击动物模型，采用HE染色以及免疫组织化学方法，研究TBI后不同时间点，额叶皮质损伤灶及周边神经组织NT的改变，从而间接检测过氧亚硝基阴离子在TBI后额叶皮质的动态变化；以及使用光学显微镜观察细胞形态学组织结构的改变。探讨ONOO~-改变的机理及意义与TBI的关系，为明确TBI后神经细胞再生和修复机制，以及临床治疗提供重要的理论依据。本实验将成年SD大鼠分为正常对照组、假手术组、颅脑损伤动物模型组。颅脑损伤动物模型组采取液压冲击法，使用不同的压力强度制成轻度、中度、重度颅脑损伤动物模型，并于损伤后1h、6h、12h、1d、3d、7d采集标本，使用免疫组织化学技术，检测大鼠额叶皮质NT的表达；并通过光学显微镜观察大鼠颅脑损伤后细胞形态学的改变。结果：①轻度、中度、重度颅脑损伤模型各组HE染色后，均可见不同程度的额叶、顶叶及脑底部、侧脑室出血，部分大鼠脑干及大脑实质内小挫裂伤灶，额叶皮质可见神经细胞呈弓型改变，其间可见散在红细胞。冲击侧大脑皮质变性、坏死的神经细胞增多（核固缩，胞浆溶解）散在出现。正常对照组及假手术组未见明显改变。②轻度颅脑损伤动物模型组NT免疫阳性表达在12h时、1d时、3d时，均明显高于同时间的正常对照组和假手术组差异显著（p<0.05）；而中度、重度颅脑损伤动物模型组NT免疫阳性表达在6h时、12h时、1d时、3d时均明显高于同时间的正常对照组以及假手术组，差异显著（p<0.05）；中、重度损伤组均高于相同时间的轻度损伤组，差异显著（p<0.05）；重度损伤组高于中度损伤组，无显著差异（p>0.05）。③大鼠TBI后，NT在轻度损伤动物模型组12h时开始增强，在中度、重度颅脑损伤动物模型组，NT于6h时开始升高，各损伤模型组均于1d时达到高峰，3d时开始降低，7d时NT的量基本消失。TBI越重，其NT免疫活性增强程度越明显。间接反应了ONOO~-在TBI后额叶皮质的动态变化。