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目的:浆细胞瘤变异型易位体1(PVT1)是一种新的长链非编码RNA,定位于8q24.21,在许多肿瘤研究中,PVT1过表达已被报道,PVT1与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移密切相关,本研究采用多种技术结合研究PVT1在前列腺癌中的作用。包括生物信息学分析、Westernblotting和细胞迁移分析,我们报道PVT1通过调节上皮间质化(EMT),促进前列腺癌的侵袭和转移,并且PVT1通过上调Twist1(一种与EMT相关的转录因子)来促进EMT,然后我们证实PVT1作为mi RNA-186-5p的海绵,并通过海绵效应对Twist1进行了正向调节。因此,本研究揭示了一种新的机制。PVT1促进前列腺癌中EMT的表达,提示PVT1/mir-186/Twist 1调节轴可能成为前列腺癌治疗的新靶点。研究方法:1.分析TCGA数据库所下载的前列腺组织以及前列腺癌基因序列中lnc RNA-PVT1的表达情况,应用real time-PCR检测前列腺细胞系WPMY-1以及前列腺癌细胞系PC-3,DU145,22RV1中lnc RNA-PVT1的表达情况;2.应用脂质体转染技术,构建高/低表达lnc RNA-PVT1的前列腺癌细胞系,并应用CCK8试剂盒检测上调与下调PVT1后前列腺癌细胞增殖能力的变化;3.应用集落形成实验评价PVT1对前列腺癌细胞增殖能力的影响;4.应用Transwell实验评价上调与下调PVT1的前列腺癌细胞系侵袭以及转移能力的影响;5.应用real time-PCR,western blot检测lnc RNA-PVT1上调或下调对于上皮间质化相关转录因子及其m RNA水平的影响;6.应用生物信息学软件预测出与PVT1存在碱基互补配对的micro RNA-186,之后用real time-PCR检测上调与下调后的前列腺癌细胞系中micro RNA-186的表达情况,然后应用荧光素酶实验证实PVT1与所预测的micro RNA-186存在结合位点;7.应用皮尔森相关分析观察PVT1与micro RNA-186在前列腺癌中的表达关系;8.应用real time-PCR,western blot检测共转染PVT1以及micro RNA-186上调与下调之后EMT相关转录因子Twist1的蛋白及其m RNA表达水平。结果:TCGA数据库分析显示相比于正常组织,PVT1在前列腺癌中表达增加,PVT1表达与淋巴转移、TNM分期以及PSA水平无相关。然而,PVT1的表达却与年龄以及格里森评分明显相关,高PVT1表达的患者相比于低PVT1表达患者预后较差。在上调PVT1表达的前列腺癌细胞系中,肿瘤细胞的增殖、侵袭以及转移能力明显增强;而在下调PVT1表达的前列腺癌细胞系中,肿瘤细胞的增殖、侵袭以及转移能力明显减弱,这提示我们PVT1能够促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭以及转移。在上调PVT1表达的前列腺癌细胞系中上皮间质化相关转录因子Twist1的蛋白及m RNA表达水平明显升高,而在下调PVT1表达的前列腺癌细胞系中上皮间质化相关转录因子Twist1的蛋白及m RNA表达水平明显降低,提示PVT1可能促进前列腺癌的上皮间质化。生物信息学软件(micro RNA)预测了与PVT1结合的mi RNA,PCR证实mi R-186的表达在前列腺癌细胞系中被PVT1反向调控,荧光素酶报告证实PVT1与mi R-186之间存在结合位点。PCR检测提示mi R-186在前列腺癌患者中表达降低,并且通过Pearson analysis揭示了前列腺癌患者中mi R-186与PVT1之间的关系。共转染结果显示,低表达PVT1下调了Twist1表达水平,而共转染si-PVT1与mi R-186-5p inhibitor之后Twist1表达上调;同样,高表达PVT1上调了Twist1,共转染pc DNA-PVT1与mi R-186-5p mimics之后Twist1表达有所下调。结论:总之,我们的研究揭示出PVT1在前列腺癌中表达上调,上调的PVT1促进了前列腺癌的细胞增殖、侵袭与转移。进一步探索发现PVT1通过吸附mi R186而上调Twist1表达,从而促进EMT。因此,我们的研究结论是PVT1/mi R-186/Twist1调控轴可能会作为前列腺癌的新型研究靶点。