【摘 要】
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目的:通过选用生脉散对2型糖尿病（T2DM）大鼠模型进行干预,观察生脉散对糖尿病诱导大鼠心肌损伤的防治作用,并基于氧化应激通路mi RNAs/PPARα/CD36探究生脉散改善糖尿病大鼠心肌损伤的作用机制。方法:取SPF级SD雄性大鼠50只,适应性饲养1周后,随机选取10只做为空白组（NC组）,其余40只高糖高脂饲养4周,然后联合小剂量多频次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立大鼠T2DM模型,
【基金项目】
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国家自然基金委； 山东省自然科学基金委；
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目的:通过选用生脉散对2型糖尿病（T2DM）大鼠模型进行干预,观察生脉散对糖尿病诱导大鼠心肌损伤的防治作用,并基于氧化应激通路mi RNAs/PPARα/CD36探究生脉散改善糖尿病大鼠心肌损伤的作用机制。方法:取SPF级SD雄性大鼠50只,适应性饲养1周后,随机选取10只做为空白组（NC组）,其余40只高糖高脂饲养4周,然后联合小剂量多频次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法建立大鼠T2DM模型,STZ注射剂量为25 mg/kg,注射频次为每隔一周注射一次,共注射三次。最后一次注射完毕72 h后空腹血糖≥11.1mmol/L者视为造模成功。将造模成功的大鼠随机分为模型（DM）组（n=15）和生脉散（SMS）组（n=15）,NC组与DM组均以5 ml/kg的体重剂量给予蒸馏水灌胃,SMS组给予相同体重剂量且生药浓度为0.36 g/m L的生脉散溶液灌胃,各组灌胃频次均为1次/d。给药10周后取大鼠心肌组织,对各组大鼠心肌组织以下指标进行检测:（1）通过HE染色对各组大鼠心肌组织细胞形态进行观察比较;（2）分别采用WST-1法、比色法、TBA法对各组大鼠心肌组织氧化应激标志物超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）水平进行检测;（3）采用荧光实时定量PCR技术检测各组大鼠心肌组织微小核糖核酸-19a（mi R-19a）及微小核糖核酸-34a（mi R-34a）的表达;（4）采用Western blot技术检测各组大鼠心肌细胞过氧化物酶体增殖剂激活受体-α（PPARα）蛋白表达水平;（5）通过免疫组化对各组大鼠心肌细胞脂肪酸转位酶簇决定因子36（CD36）表达量进行检测与分析。结果:经检测,各组大鼠心肌组织各项指标分析结果如下:（1）HE染色结果显示,与NC组相比,DM组大鼠心肌细胞出现肥大、排列紊乱、细胞间质较多等损伤,SMS组大鼠心肌细胞损伤情况较DM组得以明显改善。（2）氧化应激标志物检测表明,与NC组相比,DM组大鼠心肌SOD、GSHPx活性显著降低（P＜0.01）,MDA含量显著升高（P＜0.01）;与DM组相比,SMS组大鼠心肌SOD、GSH-Px活性显著升高,MDA含量显著减少（P＜0.01）。（3）荧光实时定量PCR检测显示,DM组大鼠心肌中mi R-34a表达量较NC组显著升高,mi R-19a表达量较NC组显著降低（P＜0.01）;与DM组相比,SMS组大鼠心肌mi R-34a表达量显著降低（P＜0.01）,相反,mi R-19a表达量显著增加（P＜0.01）。（4）Western blot技术检测结果表明,与NC组相比,DM组大鼠心肌PPARα蛋白水平显著升高（P＜0.01）;经生脉散干预后,SMS组大鼠心肌中PPARα蛋白水平显著下降（P＜0.01）。（5）经免疫组化检测及半定量分析发现,与NC组相比,DM组大鼠心肌CD36表达水平均显著升高（P＜0.01）;经生脉散干预后,SMS组大鼠心肌CD36表达水平较DM组也呈显著降低趋势（P＜0.05）。结论:T2DM环境可诱导大鼠心肌细胞损伤;T2DM大鼠心肌损伤与心肌脂质过氧化导致的氧化应激密切相关;生脉散可有效改善T2DM大鼠心肌氧化应激反应,减少心肌损伤;该作用可能与生脉散影响mi RNAs表达进而调控PPARα/CD36信号通路有关。
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