【摘 要】
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目的:通过构建SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,研究银丹心脑通软胶囊预处理在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用;探讨银丹心脑通软胶囊是否通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路抑制细胞凋亡而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。方法:将SD大鼠随机分组,每组14只,连续灌胃2周后,通过结扎大鼠左前降支（Left Anterior Descending Branch,LAD）缺血15 min,松开再灌
【基金项目】
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国家自然科学基金（82060855）,题目:基于RIPK1研究理气活血滴丸在心肌缺血再灌注损伤中抑制氧化应激导致凋亡或Parthanatos死亡的作用机制； 国家自然科学基金:81904319； 贵州省科技厅:黔科合基础-ZK[2022]重点043； 贵阳市科技局:筑科合同[2021]43-6号；
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目的:通过构建SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,研究银丹心脑通软胶囊预处理在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用;探讨银丹心脑通软胶囊是否通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路抑制细胞凋亡而减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。方法:将SD大鼠随机分组,每组14只,连续灌胃2周后,通过结扎大鼠左前降支（Left Anterior Descending Branch,LAD）缺血15 min,松开再灌注2 h建立SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。具体分组如下:（1）假手术组:1 m L生理盐水持续灌胃2周后开胸,穿线不结扎;（2）模型组:1 m L生理盐水持续灌胃2周后开胸,结扎大鼠LAD缺血15 min,松开再灌注2 h;（3）银丹低剂量组:将银丹心脑通软胶囊溶于生理盐水中,按200 mg/kg剂量连续灌胃2周后,结扎大鼠LAD缺血15 min,松开再灌注2 h;（4）银丹中剂量组:将银丹心脑通软胶囊溶于生理盐水中,按400 mg/kg剂量连续灌胃2周,开胸结扎大鼠LAD缺血15 min,松开再灌注2 h;（5）银丹高剂量组:将银丹心脑通软胶囊溶于生理盐水中,按800 mg/kg剂量连续灌胃2周后,结扎大鼠LAD缺血15 min,松开再灌注2 h。造模过程中全程检测各组大鼠心电图（Electrocardiogram,ECG）变化。成功构建SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型后,利用HE染色观察心肌细胞形态;TTC染色评估大鼠心脏梗死范围;小动物心脏超声测量各组大鼠左室舒张末内径（Left Ven-tricular end-diastolic Inner Dimension,LVIDd）、左室收缩期末内径（Left Ventricular end-systolic Inner Diameter,LVIDs）、左室射血分数（Left Ventricular Ejection Fraction,LVEF）、左室短轴缩短率（Left Ventricular Fractional Shortening,LVFS）及心搏量（Stroke Volume,SV）;免疫组化检测心肌组织中Bcl-2、Bax阳性表达水平;蛋白印迹检测心肌组织中Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果:HE结果显示,假手术组心肌细胞排列整齐,边界清楚,模型组心肌细胞间隙增宽,心肌排列不规则,心肌纤维出现断裂及炎性细胞浸润,对比模型组,不同剂量银丹组心肌细胞的损伤程度减轻,其中,银丹高剂量组细胞损伤程度最轻,其次是银丹中剂量组,最后为银丹低剂量组。TTC结果显示假手术组心脏无梗死区;与假手术组比较,模型组心肌梗死区显著增加（P＜0.05）;与模型组比较,不同剂量银丹组的心肌梗死区降低（P＜0.05）,随着银丹剂量增加,心肌梗死区越小。大鼠心脏超声结果显示,对比假手术组,模型组的LVEF、LVFS、SV显著降低（P＜0.05）;对比模型组,不同剂量银丹组的LVEF、LVFS、SV提高（P＜0.05）,随着银丹剂量的增加,LVEF、LVFS越高,而SV结果则为银丹中剂量组的值最高,其次是银丹高剂量组,最后为银丹低剂量组;与假手术组比较,模型组LVIDs增大（P＜0.05）;与模型组比较,不同剂量银丹组的LVIDs降低,剂量越高,LVIDs越低;假手术组、模型组、银丹低、银丹中、银丹高剂量组的LVIDd结果差异微小（P＞0.05）,综合大鼠心脏超声的测量结果显示,不同剂量的银丹心脑通可明显改善MIRI大鼠的心功能,银丹剂量越高,心功能改善越明显。免疫组化结果显示,与假手术比较,模型组的Bcl-2显著降低（P＜0.05）,而Bax显著增加（P＜0.05）,Bcl-2/Bax比值减小;与模型组比较,不同剂量的银丹心脑通胶囊可显著降低Bax的表达（P＜0.05）,提高Bcl-2的表达（P＜0.05）,Bcl-2/Bax比值增大。蛋白印迹结果显示,与假手术组比较,模型组的Bcl-2蛋白表达降低,但差异无统计学意义（P＞0.05）,而Bax、Cleaved Caspase-3表达显著增加（P＜0.05）,Bcl-2/Bax比值减小（P＜0.05）;与模型比较,不同剂量的银丹心脑通胶囊可降低Bax、Cleaved Caspase-3的表达,提高Bcl-2的表达,Bcl-2/Bax比值增大（P＜0.05）。结论:银丹心脑通软胶囊预处理通过调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路抑制细胞凋亡减轻大鼠MIRI。
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