RDRP蛋白是通过RNA为模板形成互补RNA的聚合酶,是RNAi中重要的扩增信号分子。在植物病原真菌中,RDRP蛋白既能够正向调控有性产孢也能够反向调控无性产孢,同时也能调节代谢物的变化。甘蓝枯萎病是由粘团专化型尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum f.sp.Conglutinans）引起的严重危害甘蓝产业的新型果蔬病害。本实验室前期初步研究发现RDRP蛋白与尖孢镰刀菌的生长发育及致病力相关,为了进一步探究Rdrp基因在尖孢镰刀菌中的作用机制,本文对Rdrp基因进行生物信息学分析的基础上,以粘团专化型尖孢镰刀菌生理1号小种野生型（FOX-A8-Wild）和其Rdrp1、Rdrp2缺失突变体（FOX-A8-△Rdrp1、FOX-A8-△Rdrp2）为材料,进行生长发育比较、代谢组分析以及对甘蓝的致病性及抗性比较,为深入解析RDRP蛋白在粘团专化型尖孢镰刀菌中的功能奠定理论基础。本文主要从以下内容展开研究:1.尖孢镰刀菌RDRP1蛋白中α螺旋最多,且α螺旋之间由短回环或者β折叠股连接,RDRP2及RDRP3中β折叠最多,形成β螺旋桨结构;功能表现上均为非跨膜亲水蛋白,有多个磷酸化位点,亚细胞定位在细胞内膜上,可能具有信号转导功能或参与相关的信号转导途径;对尖孢镰刀菌与其它30种真菌的RDRP蛋白序列进行进化分析,结果表明RDRP蛋白序列相似度高,高达87.08%,在进化上也存在一定的分化,说明它们在尖孢镰刀菌中执行的功能具有差异性。2.在PDA培养基上,Rdrp1缺失突变体菌株菌丝生长速率变慢,菌落边缘整齐且致密,菌丝分支较多、延伸生长减慢;在PDB培养液中,Rdrp缺失突变体菌株分生孢子形态变小,且由短棒状变为近似球状。Rdrp1缺失突变体菌株的菌丝生长较少,且培养皿中菌液有聚集现象,Rdrp2缺失突变体菌株的菌丝相比PDA中断裂更多;在VBC培养基上,相比于FOX-A8-Wild,Rdrp2缺失突变体菌株色素产生较少,且颜色为浅黄色;在不含有H2O2的培养基上,FOX-A8-Wild与Rdrp1缺失突变体菌株被完全抑制而Rdrp2缺失突变体菌株则生长缓慢。3.对FOX-A8-Wild及Rdrp缺失突变体菌株进行代谢组比较,结果显示,正离子模式下B v A、C v A和B v C筛选得到的的差异代谢物分别为139、131和137种,发现与野生型Rdrp相比,能够引起尖孢镰刀菌野生型与突变体菌株大量代谢物数目、种类及含量发生变化。筛选得到的差异代谢物中有机酸、氨基酸、酯类物质、糖类代谢物、醇类物质、磷酸盐和脂类物质和胺类代谢物等受Rdrp基因调控,其中有机酸和氨基酸类代谢物对尖孢镰刀菌产孢起重要作用;涉及到的差异代谢物显著在富集有机酸类代谢、氨基酸类代谢、酯类代谢、糖类代谢、醇类代谢、磷酸盐类代谢通路。已有研究证实有机酸和氨基酸类代谢物与尖孢镰刀菌的产孢密切相关,这与2中结果相一致。4.以中甘11号甘蓝为材料,对FOX-A8-Wild及Rdrp缺失突变体菌株代谢物溶液及病原菌处理后的甘蓝进行致病性及抗性比较,结果显示,与对照组相比,各处理第9～12 d全部发生整株性萎蔫直至死亡。病原菌处理下的的甘蓝植株形态建成和物质积累量均显著低于对照组,而代谢物处理后甘蓝植株形态建成和物质积累量较菌悬液处理显著减少,均呈现出先上升后下降的变化趋势;各处理组的渗透性调节物质呈现先升高后降低变化趋势,尤其在侵染后期,甘蓝中的可溶性蛋白含量显著下降。抗逆性指标均显著高于对照,而代谢物处理后3种抗氧化酶活性较菌悬液处理显著减少,均呈现出先升高后降低的变化趋势。综上所述,我们认为RDRP蛋白可能通过小RNA对有机酸和氨基酸类代谢物及其参与的有机酸类代谢、氨基酸类代谢通路进行调控,从而影响尖孢镰刀菌的分生孢子形态及产孢方式,并对毒素类代谢物及其参与的代谢通路进行调控,进而影响尖孢镰刀菌的致病力。