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【背景和目的】心房颤动（房颤）作为临床最常见的心律失常之一,可诱发卒中、猝死、心力衰竭等严重并发症,其发病率逐年上升。房颤的主要病理基础是心房重构,而心房重构中心肌纤维化起着关键作用,因此认为房颤和心肌纤维化相互促进,但确切机制仍不明确,对于房颤心肌纤维化也无有效的治疗手段。大量研究表明转化生长因子β1（TGF-β1）可作为心肌纤维化最相关的因子之一。研究发现,Smad蛋白家族是TGF-β1的关键调控因子,分为受体调节型（R-Smads）、抑制型（I-Smads）和协同调节型（Co-Smads）。Smad7属于I-Smads,是TGF-β1信号通路的抑制剂。mi RNA是保守的18-25个核苷酸的非编码RNA,通过与m RNA 3′非翻译区（3′UTR）碱基配对从而调控基因表达,mi RNA的异常表达通常与病理疾病有关。据报道mi R-15a-5p在房颤患者中表达异常,但其作用机制目前尚无研究。本研究旨在探索mi R-15a-5p与Smad7在房颤心肌纤维化中的表达和可能的调控作用机制。【方法】1、收集从2020年6月至2021年6月我院心脏外科接受瓣膜置换患者左心耳（Left atrial appendage,LAA）组织于-80℃冻存（留少许组织进行福尔马林固定）,共25例,其中房颤组患者13例,对照组患者12例。（1）定量实时聚合酶链反应（Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR）测定两组患者LAA组织mi R-15a-5p、Smad7、TGF-β1的m RNA表达水平;（2）蛋白质印迹（Western-blot,WB）检测两组患者LAA组织Smad7、TGF-β1、collagen I的蛋白表达水平;（3）苏木精-伊红（Hematoxylin-Eosin,HE）染色和羟脯氨酸含量测定对比两组患者LAA组织纤维化程度。2、用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激H9C2细胞进一步构建心肌细胞纤维化模型,分别转染mi R-15a-5p模拟物和抑制剂、pc DNA3.1-Smad7和小干扰RNA-Smad7（si RNA-Smad7）以上调或下调mi R-15a-5p和Smad7在细胞内的表达水平。（1）q RT-PCR和WB检测mi R-15a-5p、Smad7、TGF-β1和collagen I的m RNA和蛋白表达水平;（2）细胞计数试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷（5-Ethynyl-2′-deoxyuridine,Ed U）测定细胞活力和增殖能力。3、基于Target Scan和RNAHybrid等综合预测分析发现Smad7的3′UTR有一个mi R-15a-5p的靶位点的基础上,双荧光素酶报告基因检测验证mi R-15a-5p和Smad7的相互作用。4、统计分析,计数资料以百分比表示,计量资料以均数±标准误（Mean±SEM）表示,采用独立样本t检验分析两组间的显著性差异。两组以上的差异采用单因素方差分析（ANOVA）,然后进行事后检验。P＜0.05认为结果有统计学差异。【结果】1、两组基线特征结果显示,两组的左心房内径（LAD）有显著差异（61.69±3.67 vs 45.17±1.762,P＜0.05）,其它基线资料在统计学上无差异。与对照组相比,房颤组患者LAA组织中mi R-15a-5p及纤维化标志物（TGF-β1和collagen I）的表达水平上调,而Smad7的表达则相反。2、在LPS刺激的H9C2细胞模型中,mi R-15a-5p m RNA（4.76±0.58 vs 1.00±0.10,P＜0.001）表达上调。与对照组相比,细胞模型组纤维化标志物collagen I在基因（2.12±0.19 vs 1.00±0.19,P＜0.001）和蛋白（2.11±0.01 vs 1.00±0.11,P＜0.001）表达水平均上调。在细胞模型中转染pc DNA3.1-Smad7或mi R-15a-5p抑制剂,纤维化化标志物collagen I和TGF-β1的m RNA和蛋白表达水平、细胞活力和增殖能力均不同程度受抑制,而进一步的反馈实验证实si RNA-Smad7可以一定程度逆转mi R-15a-5p抑制剂的抑制作用。3、H9C2细胞中转染mi R-15a-5p模拟物可以抑制Smad7的表达,双荧光素酶报告基因检测实验验证了mi R-15a-5p对Smad7有靶向调节作用。【结论】1、mi R-15a-5p表达上调和Smad7表达下调可能与房颤患者心肌细胞纤维化相关。2、下调mi R-15a-5p或上调Smad7可抑制细胞模型中的纤维化标志物的表达、细胞活力和增殖能力,可能具有抑制纤维化的作用。3、在H9C2细胞中mi R-15a-5p直接靶向调节Smad7的表达。4、mi R-15a-5p/Smad7可能是我们未来治疗房颤的一个潜在的有效途径。TGF-β1/collagen I可能是其下游信号通路。