从新疆哈萨克族、维吾尔族2型糖尿病人粪便分离的D菌、V菌对小鼠影响的研究

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目的:1.新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病人群粪样中D菌、V菌的分离培养。2.观察D菌对C57小鼠的糖脂代谢的影响,初步探究D菌与2型糖尿病之间的关系。观察V菌对C57小鼠的糖脂代谢的影响,初步探究V菌与2型糖尿病之间的关系。方法:1.分别使用D菌、V菌专属培养基对两目标菌进行分离培养,进行传统形态学观察、生化鉴定、使用全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定及目标菌的16SrDNA鉴定。2.将C57BL/6雄性小鼠按体重均衡随机分为四组,分别为正常饮食组、正常饮食+D菌组、高脂饮食、高脂饮食+D菌。于菌液干预的0周、4周、8周、12周、16周,尾尖血检测其空腹血糖(FBG)、随机血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、做胰岛素耐量实验(ITT)及糖耐量实验(OGTT)。3..将C57BL/6雄性小鼠按体重均衡随机分为四组,分别为正常饮食组、正常饮食+V菌组、高脂饮食、高脂饮食+V菌。检测指标等与D菌一致。结果:1.新疆维吾尔族、哈萨克族2型糖尿病人群粪样中分离培养D菌,根据细菌鉴定手册及D菌16SrDNA目的片段扩增,获得D菌;V菌传统形态学观察、生化鉴定结果均与细菌鉴定手册描述相吻合,16SrDNA目的扩增获得目的片段,结合全自动细菌鉴定仪鉴定结果,证实获得V菌。2.给予小鼠D菌灌胃4周后,高脂饮食+D菌组小鼠体重增加具有统计学意义,12周起D菌组随机血糖、空腹血糖升高,差异具有统计学意义(p<0.05,p<0.05),8周起,与高脂饮食组比较,高脂饮食+D菌组空腹总胆固醇水平升高,差异具有统计学意义(p<0.05);整个实验周期,D菌对小鼠TG水平的影响均无统计学意义;4周起高脂饮食+D菌组出现糖耐量异常,ITT、OGTT曲线下面积升高(p<0.05)。3.给予小鼠V菌灌胃3周后,高脂饮食+V菌组小鼠体重增加具有统计学意义(p<0.05),8周起,高脂饮食+V菌组小鼠随机血糖、总胆固醇水平升高(p<0.05),12周起,高脂饮食+V菌组小鼠空腹血糖升高(p<0.05)。8周起高脂饮食+V菌组出现糖耐量异常,ITT、OGTT曲线下面积升高(p<0.05)。结论:1.D菌、V菌在高脂饮食的影响下,可以引起小鼠糖糖脂代谢异常,其作用机制有待进一步研究。
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