【摘 要】
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目的:分析高毒力肺炎克雷伯菌(Hypervirulent Klebsiella pneumoniae,HvKP)和普通肺炎克雷伯菌(Classic Klebsiella pneumoniae,CKP)的耐药情况。探究HvKP的荚膜分型、毒力基因及其分布情况。了解HvKP的流行特征、感染危险因素及感染类型。方法:收集贵州某三级甲等医院住院患者各种标本中分离出的非重复肺炎克雷伯菌227株,通过粘液拉丝
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目的:分析高毒力肺炎克雷伯菌(Hypervirulent Klebsiella pneumoniae,HvKP)和普通肺炎克雷伯菌(Classic Klebsiella pneumoniae,CKP)的耐药情况。探究HvKP的荚膜分型、毒力基因及其分布情况。了解HvKP的流行特征、感染危险因素及感染类型。方法:收集贵州某三级甲等医院住院患者各种标本中分离出的非重复肺炎克雷伯菌227株,通过粘液拉丝试验和毒力基因检测筛选出HvKP,统计HvKP和CKP菌株不同来源和科室分布的比例;采用病例对照的方式对HvKP和CKP两组患者进行回顾性统计分析;采用Micro Scan Walk Away 96 plus全自动细菌鉴定与药敏分析系统对所有菌株进行药敏试验。采用聚合酶链式反应(PCR)方法检测高毒力肺炎克雷伯菌常见的6种荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54、K57)和9种毒力基因(rmp A、all S、kfu BC、Wca G、aerobaction、mrk D、ent B、ybt S、fim H)的携带情况。应用多位点基因序列分型(MLST)技术对菌株进行分子分型。采用ERIC-PCR方法对菌株进行同源性分析。结果:共分离出非重复性肺炎克雷伯菌227株,主要来源于呼吸道(59.03%)、尿道(13.65%)和血液标本(11.45%);肺炎克雷伯菌检出的主要科室分布在重症监护室(21.15%)、神经外科(8.37%)和急诊神经科(7.49%)。拉丝试验及毒力基因检测,最终确定有77株KP为高毒力肺炎克雷伯菌(HvKP),150株为普通肺炎克雷伯菌CKP。77株HvKP中来源于呼吸道的标本占63.64%(49/77),血液占16.89(13/77),胸腹水及引流液占5.19%(4/77),尿液占3.90%(3/77),其他标本占10.39%(8/77)。77株HvKP与150株CKP的临床资料回顾性分析发现,HvKP感染患者主要来源于医院获得性感染,与CKP的比较差异具有统计学意义(P<0.05)。HvKP感染患者中糖尿病、多部位感染、肺部疾病、降钙素原检测、入住ICU率和CKP患者比较具有统计学意义(P<0.05)。从实验室指标白细胞计数、C反应蛋白、中性粒细胞百分比、住院天数、最高体温、是否存在脓毒性休克、死亡率等资料来看,感染HvKP患者和感染CKP患者比较并无区别。来源于血液和无菌体液的HvKP与CKP感染中糖尿病、肝脓肿和侵入性操作的比较差异具有统计学意义(P<0.05)。对77株HvKP和150株CKP进行药敏试验,HvKP对青霉素类、碳青霉烯类、头孢菌素类和喹诺酮类药物的的耐药率都明显低于CKP。HvKP相关荚膜血清型检测。K1型占48.05%(37/76),K2型占24.68%(19/76),K57型占14.29%(11/76),K20占3.90%(3/76),K54占5.19%(4/76),K5占2.60%(2/76)。毒力基因rmp A、aerobactin、ent B、ybt S、kfu BC、Wca G和all S基因的检出率也大于CKP,且all S基因几乎全部存在于K1型菌株。对HvKP进行多位点序列分型,共发现21种ST型,ST23、ST65型和ST86型为最主要的ST型。其中ST23全部存在与K1型菌株中,K2型主要对应ST65、ST86、ST25和ST218。对HvKP进行同源性分析发现,有18株HvKP属于I型,II-V型各5株,VI-VIII型各4株,IX-XI型各3株,XII-XIV型各2株,其他12株分别表现出独特的DNA图谱。其中I/ST23 K1型主要见于ICU科室。结论:HvKP的检出率为33.92%,主要为呼吸道标本。主要的荚膜血清型是K1型、K2型和K57型,all S基因几乎全部存在于K1型菌株。HvKP容易引起医院获得性感染,糖尿病、侵入性操作和入住ICU可能是感染HvKP的危险因素。HvKP能引起多部位感染,对常用的抗生素都比较敏感;HvKP进行MLST分型和ERIC-PCR分析发现HvKP以I/ST23 K1型为主。
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