益肾祛浊方干预PCOS-IR模型大鼠性激素及胰岛素相关受体表达的实验研究

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目的:采用来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养的方法构建多囊卵巢综合征胰岛素抵抗(polycystic ovary syndrome-insulin resistance,PCOS-IR)大鼠模型,探索益肾祛浊方对PCOS-IR模型大鼠体重、腹围、卵巢体积、卵巢中卵泡数量的影响,并研究该方药对模型大鼠体内雄激素受体(androgenreceptor,AR)、促黄体生成素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)、胰岛素受体(insulin receptor,INSR)、胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factors 1 receptor,IGF-1R)、胰岛素受体底物 1 受体(insulinreceptor substrate 1 receptor,IRS-1R)等内分泌与代谢相关受体在垂体、卵巢、胃底部、结肠部不同组织的表达及其干预作用。以探究益肾祛浊方对于PCOS-IR的疗效与作用机制。方法:将6~8周龄SPF级SD雌性大鼠108只随机分为9组:空白组,模型组,益肾祛浊高、中、低剂量组,益肾组,二甲双胍组,达英-35组,达英-35联合二甲双胍组,每组12只。空白组给予普通饲料喂养,其余各组均给予来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养至第27天;然后给予相应药物灌胃2周,喂养期间定期测量大鼠体重、身长、腹围等数据并计算大鼠Lee’s指数(评价成年大鼠肥胖程度的指标)。治疗结束后留取大鼠垂体、卵巢、胃底部、结肠部等组织。测量大鼠卵巢体积与重量。将上述组织进行脱水制作石蜡切片,所取卵巢进行HE染色,光镜下计算卵巢中卵泡数量。采用免疫荧光法检测各组大鼠卵巢中AR、LHR、INSR、IGF-1R、IRS-1R的表达情况;检测大鼠胃底部和结肠部AR、LHR、INSR、IGF-1R的表达情况;检测大鼠垂体AR、LHR、IGF-1R的表达情况。结果:治疗14天后发现,益肾祛浊方组大鼠体重、腹围、Lee’s指数均较模型组大鼠下降(P<0.05),卵巢体积缩小(P<0.05),与模型组比较异常增多的卵泡减少(P<0.05)。益肾祛浊方组大鼠卵巢中AR、LHR、INSR表达的IOD值下降(P<0.05),IGF-1R表达上升(P<0.05),IRS-1R无明显变化(P>0.05)。在胃底部AR表达下降(P<0.01),胃肠中LHR、INSR表达下降(P<0.05),IGF-1R表达上升(P<0.05)。结肠部AR的表达各组均无差异(P>0.05)。在垂体AR、LHR表达下降(P<0.05),IGF-1R表达上升(P<0.05)。结论:益肾祛浊方对PCOS-IR具有良好的治疗效果,整体效果优于单纯益肾中药组。其作用机制可能是改善卵巢的高雄激素和高胰岛素环境,并改善胃肠中代谢相关受体的表达,促进胃肠代谢功能趋于正常,通过调整胃肠影响生殖轴,恢复或提高下丘脑-垂体-卵巢轴功能,从而阻断内分泌和代谢紊乱的恶性循环,恢复卵巢的正常排卵功能,达到治疗疾病的目的。
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