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摘要：目的：探讨阿司匹林与DNA相互作用的表面增强拉曼光谱与紫外光谱。方法：通过检测阿司匹林对照品与肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱，归属各个振动峰位和增强峰位；研究阿司匹林与DNA相互作用关系。结果：阿司匹林对照品与肠溶片的NRS及SERS图谱相似度高，药品辅料对阿司匹林的检测无明显影响；阿司匹林分子与DNA相互作用的主要键合模式是插入作用，阿司匹林中的苯环和羰基插入到碱基对之间。结论：通过研究阿司匹林与DNA相互作用，了解此类药物作用机理，为临床下一步工作提供借鉴和参考。
关键词：拉曼光谱；表面增强拉曼光谱；紫外光谱；阿司匹林；DNA
阿司匹林是临床中应用时间较长的非甾体抗炎药，主要用于治疗发热、疼痛、炎症以及风湿等症状。有关研究资料发现[1]，阿司匹林能够降低心脏病和中风的发生率，同时对大肠癌以及心脑血管疾病等症状有一定作用。DNA是细胞内的重要成分，所以以分子水平的角度探讨药物小分子与DNA的相互作用，对于分析药物作用机理和研制新药具有重要的意义[2]。本研究通过检测阿司匹林对照品与肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱，探讨阿司匹林与DNA相互作用的表面增强拉曼光谱与紫外光谱。现报道分析如下。
1.资料与方法
1.1仪器与试剂 RFS-100/s型傅里叶变换拉曼光谱仪；Nd∶YAG激光光源；液氮冷却Ge检测器；UV-2450型紫外-可见分光光度计；S4800型扫描电子显微镜；AnkeTGL-16G型台式高速离心机；CQ50型超声波清洗器；小牛胸腺DNA；阿司匹林对照品；阿司匹林肠溶片。全部试剂均为分析纯。
1.2方法 根据Lee方法制备得到灰银胶，对其进行离心提纯（转速：5000r·min-1；离心：10min），取下层溶液，滴入超纯水，超声震荡5min；重复两次得到浓度较大、纯度较高的银胶。采用蒸馏水配制0.01g·mL-1的DNA溶液；配制阿司匹林对照品的标准溶液（浓度：2.5×10-3mol·L-1）；将一粒阿司匹林肠溶片研磨成粉状，采用蒸馏水溶解过滤后，转移至100mL容量瓶，稀释至刻度并摇匀。
2.结果
2.1银胶表面形态分析研究 采用柠檬酸三钠还原硝酸银得到银胶，离心提纯后，由于浓度升高并且降低了其表面吸附的杂质，从而更有利于样品分子吸附到纳米银表面[3]。
2.2阿司匹林的拉曼光谱分析研究 对照品与肠溶片振动峰基本无差异，提示药品辅料对阿司匹林检测无明显影响。阿司匹林溶液与对照品SERS相似，主要基团拉曼峰仅仅出现微小变化。
2.3阿司匹林与DNA的相互作用分析研究
2.3.1表面增强拉曼光谱法分析研究 体积比阿司匹林：DNA=1∶1时效果最好。加入DNA后，阿司匹林中2938、1590、1541、1033、524以及420cm-1峰出现偏移，3065、2938、1590、1033、759、728以及420cm-1等峰明显减弱甚至消失，提示由于阿司匹林与DNA的键合作用，造成阿司匹林分子结构出现改变。加入DNA造成阿司匹林SERS信号强度减弱，提示二者相互作用的主要键合模式为插入作用。
2.3.2紫外光谱法分析研究 加入DNA后，阿司匹林紫外吸收峰出现明显红移；随着阿司匹林与DNA体积比的降低，吸收强度逐渐变小，进一步证明了主要键合模式为插入作用。发生红移的原因主要为DNA碱基对与阿司匹林分子出现π 电子堆积，使后者π空轨道被电子补充，造成其荷电跃迁机会降低[4]。
3.讨论
通过探讨阿司匹林对照品与阿司匹林肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱，阿司匹林对照品与肠溶片的NRS及SERS图谱相似度高，药品辅料对阿司匹林的检测无明显影响；阿司匹林分子与DNA相互作用的主要键合模式是插入作用，阿司匹林中的苯环和羰基插入到碱基对之间。综上所述，通过研究阿司匹林与DNA相互作用，了解此类药物作用机理，为临床下一步工作提供借鉴和参考。
参考文献：
【1】 Ruchita S.Das，Y.K.Agrawal.Raman spectroscopy：Recent advancements，techniques and applications^].Vibrational Spectroscopy，2011，57：163-176
【2】 刘炜，毕和平，张连华等.阿司匹林与DNA相互作用的光谱研究[J].安徽农业科学，2009，37（15）：6837-6838
【3】 康倩倩，周光明.拉曼和紫外光谱法研究阿司匹林及其与DNA的相互作用[J].光谱学与光谱分析.2012，32（3）：699-702/
【4】 康倩倩，周光明.光谱法研究阿莫西林及其与DNA的相互作用，光散射学报，2011，23（4）：368-375.
关键词：拉曼光谱；表面增强拉曼光谱；紫外光谱；阿司匹林；DNA
阿司匹林是临床中应用时间较长的非甾体抗炎药，主要用于治疗发热、疼痛、炎症以及风湿等症状。有关研究资料发现[1]，阿司匹林能够降低心脏病和中风的发生率，同时对大肠癌以及心脑血管疾病等症状有一定作用。DNA是细胞内的重要成分，所以以分子水平的角度探讨药物小分子与DNA的相互作用，对于分析药物作用机理和研制新药具有重要的意义[2]。本研究通过检测阿司匹林对照品与肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱，探讨阿司匹林与DNA相互作用的表面增强拉曼光谱与紫外光谱。现报道分析如下。
1.资料与方法
1.1仪器与试剂 RFS-100/s型傅里叶变换拉曼光谱仪；Nd∶YAG激光光源；液氮冷却Ge检测器；UV-2450型紫外-可见分光光度计；S4800型扫描电子显微镜；AnkeTGL-16G型台式高速离心机；CQ50型超声波清洗器；小牛胸腺DNA；阿司匹林对照品；阿司匹林肠溶片。全部试剂均为分析纯。
1.2方法 根据Lee方法制备得到灰银胶，对其进行离心提纯（转速：5000r·min-1；离心：10min），取下层溶液，滴入超纯水，超声震荡5min；重复两次得到浓度较大、纯度较高的银胶。采用蒸馏水配制0.01g·mL-1的DNA溶液；配制阿司匹林对照品的标准溶液（浓度：2.5×10-3mol·L-1）；将一粒阿司匹林肠溶片研磨成粉状，采用蒸馏水溶解过滤后，转移至100mL容量瓶，稀释至刻度并摇匀。
2.结果
2.1银胶表面形态分析研究 采用柠檬酸三钠还原硝酸银得到银胶，离心提纯后，由于浓度升高并且降低了其表面吸附的杂质，从而更有利于样品分子吸附到纳米银表面[3]。
2.2阿司匹林的拉曼光谱分析研究 对照品与肠溶片振动峰基本无差异，提示药品辅料对阿司匹林检测无明显影响。阿司匹林溶液与对照品SERS相似，主要基团拉曼峰仅仅出现微小变化。
2.3阿司匹林与DNA的相互作用分析研究
2.3.1表面增强拉曼光谱法分析研究 体积比阿司匹林：DNA=1∶1时效果最好。加入DNA后，阿司匹林中2938、1590、1541、1033、524以及420cm-1峰出现偏移，3065、2938、1590、1033、759、728以及420cm-1等峰明显减弱甚至消失，提示由于阿司匹林与DNA的键合作用，造成阿司匹林分子结构出现改变。加入DNA造成阿司匹林SERS信号强度减弱，提示二者相互作用的主要键合模式为插入作用。
2.3.2紫外光谱法分析研究 加入DNA后，阿司匹林紫外吸收峰出现明显红移；随着阿司匹林与DNA体积比的降低，吸收强度逐渐变小，进一步证明了主要键合模式为插入作用。发生红移的原因主要为DNA碱基对与阿司匹林分子出现π 电子堆积，使后者π空轨道被电子补充，造成其荷电跃迁机会降低[4]。
3.讨论
通过探讨阿司匹林对照品与阿司匹林肠溶片的常规拉曼光谱和表面增强拉曼光谱，阿司匹林对照品与肠溶片的NRS及SERS图谱相似度高，药品辅料对阿司匹林的检测无明显影响；阿司匹林分子与DNA相互作用的主要键合模式是插入作用，阿司匹林中的苯环和羰基插入到碱基对之间。综上所述，通过研究阿司匹林与DNA相互作用，了解此类药物作用机理，为临床下一步工作提供借鉴和参考。
参考文献：
【1】 Ruchita S.Das，Y.K.Agrawal.Raman spectroscopy：Recent advancements，techniques and applications^].Vibrational Spectroscopy，2011，57：163-176
【2】 刘炜，毕和平，张连华等.阿司匹林与DNA相互作用的光谱研究[J].安徽农业科学，2009，37（15）：6837-6838
【3】 康倩倩，周光明.拉曼和紫外光谱法研究阿司匹林及其与DNA的相互作用[J].光谱学与光谱分析.2012，32（3）：699-702/
【4】 康倩倩，周光明.光谱法研究阿莫西林及其与DNA的相互作用，光散射学报，2011，23（4）：368-375.