【摘 要】
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为了研究禽流感病毒的反向遗传,试验采用霍夫曼发明的8质粒拯救系统,将分离得到的AIV Isolate3（H9N2）基因组,通过RT-PCR得到HA基因,并克隆到以pcDNA3质粒为骨架自行构建的双向转录/表达载体pHW2008上,得到HA转录/表达质粒,再将HA表达质粒与构建好的包含A/Puerto Rico/8/34（H1N1）7个内部基因双向转录/表达质粒共转染人肾上皮细胞（293T）与犬肾细
【基金项目】
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国家科技重大专项（2009ZX10004-103）； “十一五”国家科技支撑计划项目（2010BAD04B02）； 吉林省科技发展计划项目（20090486;20090487）；
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为了研究禽流感病毒的反向遗传,试验采用霍夫曼发明的8质粒拯救系统,将分离得到的AIV Isolate3（H9N2）基因组,通过RT-PCR得到HA基因,并克隆到以pcDNA3质粒为骨架自行构建的双向转录/表达载体pHW2008上,得到HA转录/表达质粒,再将HA表达质粒与构建好的包含A/Puerto Rico/8/34（H1N1）7个内部基因双向转录/表达质粒共转染人肾上皮细胞（293T）与犬肾细胞（MDCK）混养细胞。结果表明:试验成功构建了重配H9N1亚型流感病毒减毒株。
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