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摘要：目的：探讨CD147与CK20的检测对结直肠癌诊断的意义。
方法：随机选取2012年3月—2013年9月间来我院肿瘤科接受治疗的直肠癌患者93名，应用免疫组化技术测定患者结直肠癌组织中CD147与CK20的表达情况。
结果：93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，CD147阳性可能与患者癌细胞淋巴结转移有关，而CK20检测阳性可能与结直肠癌转移以及侵润程度有关。
结论：CD147与CK20的表达无相关性，联合检测结直肠癌可疑患者CD147与CK20的表达情况对结直肠癌的诊断治疗以及预后具有重要意义。
关键词：CD147 CK20 结直肠癌 免疫组化
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.10.005
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）10-0005-01
结直肠癌（colorectal carcinoma）即大肠癌，包括直肠癌与结肠癌，是消化道常见恶性肿瘤。其发病率因地区不同而有明显差异，以北美洲、大洋洲为最高，欧洲居中、亚非地区较低[1]。我国结直肠癌的发病率也有明显差异，可能是由于生活习惯以及食物结构的不同，我国南方地区结直肠癌发病率明显高于北方。近20年来，世界上大多数国家结直肠癌的发病率呈明显上升趋势，我国结直肠癌的发病率增速亦十分明显，而结直肠癌的血清学诊断由于灵敏度不高而不受关注[2]，我院为探讨CD147与CK20的检测对结直肠癌诊断的意义而展开了此次分析，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料。随机选取2012年3月—2013年9月间来我院肿瘤科接受手术切除治疗的直肠癌患者93名，患者年龄29—78岁，平均（59.3±5.4）岁，其中女性患者44例，患者年龄29—76岁，平均（59.0±5.4）岁；男性患者49例患者年龄29—78岁，平均（59.5±5.4）岁。所选患者排除高血压，糖尿病等疾病，在手术前未做其他治疗。患者结直肠癌根据国际抗癌联盟提出的TNM分级系统分为I期22例，II期26例，III期32例，IV期13例。
1.2 手术方法。首先做好手术准备，手术前一天晚上禁食，进入手术室后先采用全麻，然后进行常规消毒铺巾，打开腹腔镜操作手术野，分离需要切除的结直肠，最后切除病变组织，将切除组织送入病理科检查。
1.3 标本制备与检测。镜将手术切除送病检组织用固定、脱水、透明、侵蜡、包埋最后连续切片备用，切片标本厚度为4um然后用免疫组化技术测定CD147与CK20的表达情况[3]，CD147多克隆抗体来自于上海沪峰化工有限公司，SABC免疫组化试剂盒购买于武汉意德生物技术有限公司。CD147的测定：采用仪器对显微镜以及其他显微设备对所制作的标本进行观察并用图像分析仪器对所得图像进行分析，观察时先采用低倍镜再采用高倍镜进行观察，低倍镜下如出现癌细胞胞浆有棕黄色颗粒出现说明该组织中有CD147为阳性。在高倍显微镜下观察时随机取8个高倍显微镜视野，观察阳性癌细胞数以及异性细胞数占所观察癌细胞数以及异性细胞数的比例，如所占比例小于5%则判定为阴性，如大于5%则判定为阳性。CK20的测定：同样先应用低倍显微镜进行观察，然后采用高倍显微镜观察，取8个高倍显微镜下视野，观察肿瘤细胞，如有棕褐色细胞则占所观察细胞的10%则说明CK20表达阳性。
1.4 统计学方法。应用SPSS19.0软件进行分析，计量数据采用均数±标准差（X±S）表示，组间比较采用t 检验，计数资料采用X2检验进行验证。如果统计得出P>0.05，则差异无统计学意义，P<0.05，则说明差异有统计学意义。
2 结果
93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，不同病理特征的患者CD147与CK20的表达差异不明显，结直肠癌不同分期患者CD147与CK20表达情况也无明显差异[4]，淋巴结转移患者与淋巴结未转移患者CD147以及CK20表达具有明显差异；而CK20表达与侵润程度具有相关性，详细结果见下表。
注：93例患者中由于8例患者对CK20未做出结果，因此将做出结果的85例患者进行统计学分析；男性与女性 CK20阳性比例比较P=0.8517，无统计学意义，大于60岁患者与小于60岁患者 CK20阳性比例比较P=0.6143，无统计学意义；不同分期患者 CK20阳性比例比较P=0.7912，无统计学意义，淋巴转移患者与未转移患者 CK20阳性比例比较P=0.0461，有统计学意义；侵润与未侵润患者 CK20阳性比例比较P=0.0361，有统计学意义。
3 讨论
结直肠癌（colorectal carcinoma）即大肠癌，包括直肠癌与结肠癌，直肠癌是胃肠道常见恶性肿瘤，我国以41—65岁患者发病率高。近20年来特别是在大城市，该病发病率明显升高，从病因来看，大多来自腺瘤癌变，从形态学上可见到增生、腺瘤及癌变各阶段以及相应的软色体改变。随分子生物学的发展，同时存在不同的基因表达亦渐被认识，很多新的基因也被发现参与到该疾病的发展过程中。直肠癌是乙状结肠直肠交界处至齿状线之间的癌，较为常见，在我国直肠癌比结肠癌发生率高，而且低位直肠癌所占比例高，大多数患者通过直肠指诊可触及。随着结直肠癌发病率的增高，对该病的早期诊断显得尤为重要，目前的血清学诊断灵敏度与特异度并不高，随着分子生物学的发展，某些新型肿瘤相关基因表达的蛋白被应用于肿瘤的诊断[6]，我院为探讨CD147与CK20的检测对结直肠癌诊断的意义而展开了此次分析。 CD147参与机体多个生理过程，对细胞之间的黏附具有调节作用，而且有研究表明部分肿瘤组织中CD147的表达明显增加，有研究证明 CD147可诱导纤维细胞分泌MMP，且与肿瘤转移有关，CD147在原发肿瘤与低分化肿瘤组织中可以表达增加，促进肿瘤细胞的转移[7]。而CK20是一种细胞角蛋白，属于多肽类，是细胞骨架组成成分之一，组织特异性高；以往研究发现CK20在几乎所有的结直肠癌患者中的表达都升高，在发生转移与侵袭的组织中浓度可保持稳定，因此是一种很好的肿瘤标志物[8]。
本次研究我院选取了来我院治疗的93例结直肠癌患者，在手术切除肿瘤组织后进行CD147与CK20的检测，我们发现93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，而在分析其他因素与这两个标志物表达的关系时我们发现，患者性别、年龄、肿瘤分期等因素对患者CD147与CK20检测阳性率并无多大影响[9]，这一结果也与以往研究结果相一致，同时我们分析表1与表2的数据我们发现结直肠癌发生转移侵润的患者与未发生转移侵润的患者其CD147与CK20检测阳性率却具有明显差异，这说明CD147与CK20的检测可以反映患者结直肠癌的转移侵润情况，因此在临床对患者CD147与CK20进行检测可以提高临床诊断的准确性，对指导治疗以及分析患者预后情况具有重要意义[10]。
综上所述，CD147与CK20是两种重要的结直肠癌肿瘤标志物，其组织特异性高，联合检测结直肠癌患者CD147与CK20的表达情况对结直肠癌的诊断治疗以及预后具有重要意义。
参考文献
[1] 宗海峰.结直肠癌筛查的研究现状[J].结直肠肛门外科，2013，47（26）：129—130
[2] Ikoma H，Ichikawa D，Daito I，etal.Clinical application of methylation specific polymerase chain reaction in serum of patients with gastric cancer [J].Hepatoga stroenterology.2007，54（75）：946-950
[3] 王字玲.CD147的研究进展[J].生物技术通讯，2013，37（08）：245—246
[4] 郭琨.结直肠癌中CD147和CK20的表达及其临床意义[J].现代肿瘤医学，2013，61（33）：471—472
[5] 唐志鹏.RNAi CD147溶瘤腺病毒对结直肠癌的靶向治疗作用及机制研究[J].南京医科大学，2012，54（36）：941—942
[6] 许昕.血清癌胚抗原、糖类抗原19-9与结直肠癌预后的相关性分析[J].大连医科大学，2012，27（13）：814—815
[7] Raj GV，Moreno JG，Gomella LG，et a1.Utilization of polymerase chain reaction technology in the detection of sloid tumors.Cancer 1998；82：1419-1442
[8] 程海玉.外周血CK20 mRNA表达与结直肠癌临床病理和预后的关系[J].世界华人消化杂志，2012，36（17）：618—619
[9] 谢伟.CD147和MMP-9在结直肠癌组织中的表达及临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2013，41（25）：948—949
[10] 苏秀兰.结直肠癌相关肿瘤标志物的研究进展[J].医学综述，2014，21（13）：319—320
方法：随机选取2012年3月—2013年9月间来我院肿瘤科接受治疗的直肠癌患者93名，应用免疫组化技术测定患者结直肠癌组织中CD147与CK20的表达情况。
结果：93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，CD147阳性可能与患者癌细胞淋巴结转移有关，而CK20检测阳性可能与结直肠癌转移以及侵润程度有关。
结论：CD147与CK20的表达无相关性，联合检测结直肠癌可疑患者CD147与CK20的表达情况对结直肠癌的诊断治疗以及预后具有重要意义。
关键词：CD147 CK20 结直肠癌 免疫组化
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2014.10.005
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801（2014）10-0005-01
结直肠癌（colorectal carcinoma）即大肠癌，包括直肠癌与结肠癌，是消化道常见恶性肿瘤。其发病率因地区不同而有明显差异，以北美洲、大洋洲为最高，欧洲居中、亚非地区较低[1]。我国结直肠癌的发病率也有明显差异，可能是由于生活习惯以及食物结构的不同，我国南方地区结直肠癌发病率明显高于北方。近20年来，世界上大多数国家结直肠癌的发病率呈明显上升趋势，我国结直肠癌的发病率增速亦十分明显，而结直肠癌的血清学诊断由于灵敏度不高而不受关注[2]，我院为探讨CD147与CK20的检测对结直肠癌诊断的意义而展开了此次分析，现报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料。随机选取2012年3月—2013年9月间来我院肿瘤科接受手术切除治疗的直肠癌患者93名，患者年龄29—78岁，平均（59.3±5.4）岁，其中女性患者44例，患者年龄29—76岁，平均（59.0±5.4）岁；男性患者49例患者年龄29—78岁，平均（59.5±5.4）岁。所选患者排除高血压，糖尿病等疾病，在手术前未做其他治疗。患者结直肠癌根据国际抗癌联盟提出的TNM分级系统分为I期22例，II期26例，III期32例，IV期13例。
1.2 手术方法。首先做好手术准备，手术前一天晚上禁食，进入手术室后先采用全麻，然后进行常规消毒铺巾，打开腹腔镜操作手术野，分离需要切除的结直肠，最后切除病变组织，将切除组织送入病理科检查。
1.3 标本制备与检测。镜将手术切除送病检组织用固定、脱水、透明、侵蜡、包埋最后连续切片备用，切片标本厚度为4um然后用免疫组化技术测定CD147与CK20的表达情况[3]，CD147多克隆抗体来自于上海沪峰化工有限公司，SABC免疫组化试剂盒购买于武汉意德生物技术有限公司。CD147的测定：采用仪器对显微镜以及其他显微设备对所制作的标本进行观察并用图像分析仪器对所得图像进行分析，观察时先采用低倍镜再采用高倍镜进行观察，低倍镜下如出现癌细胞胞浆有棕黄色颗粒出现说明该组织中有CD147为阳性。在高倍显微镜下观察时随机取8个高倍显微镜视野，观察阳性癌细胞数以及异性细胞数占所观察癌细胞数以及异性细胞数的比例，如所占比例小于5%则判定为阴性，如大于5%则判定为阳性。CK20的测定：同样先应用低倍显微镜进行观察，然后采用高倍显微镜观察，取8个高倍显微镜下视野，观察肿瘤细胞，如有棕褐色细胞则占所观察细胞的10%则说明CK20表达阳性。
1.4 统计学方法。应用SPSS19.0软件进行分析，计量数据采用均数±标准差（X±S）表示，组间比较采用t 检验，计数资料采用X2检验进行验证。如果统计得出P>0.05，则差异无统计学意义，P<0.05，则说明差异有统计学意义。
2 结果
93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，不同病理特征的患者CD147与CK20的表达差异不明显，结直肠癌不同分期患者CD147与CK20表达情况也无明显差异[4]，淋巴结转移患者与淋巴结未转移患者CD147以及CK20表达具有明显差异；而CK20表达与侵润程度具有相关性，详细结果见下表。
注：93例患者中由于8例患者对CK20未做出结果，因此将做出结果的85例患者进行统计学分析；男性与女性 CK20阳性比例比较P=0.8517，无统计学意义，大于60岁患者与小于60岁患者 CK20阳性比例比较P=0.6143，无统计学意义；不同分期患者 CK20阳性比例比较P=0.7912，无统计学意义，淋巴转移患者与未转移患者 CK20阳性比例比较P=0.0461，有统计学意义；侵润与未侵润患者 CK20阳性比例比较P=0.0361，有统计学意义。
3 讨论
结直肠癌（colorectal carcinoma）即大肠癌，包括直肠癌与结肠癌，直肠癌是胃肠道常见恶性肿瘤，我国以41—65岁患者发病率高。近20年来特别是在大城市，该病发病率明显升高，从病因来看，大多来自腺瘤癌变，从形态学上可见到增生、腺瘤及癌变各阶段以及相应的软色体改变。随分子生物学的发展，同时存在不同的基因表达亦渐被认识，很多新的基因也被发现参与到该疾病的发展过程中。直肠癌是乙状结肠直肠交界处至齿状线之间的癌，较为常见，在我国直肠癌比结肠癌发生率高，而且低位直肠癌所占比例高，大多数患者通过直肠指诊可触及。随着结直肠癌发病率的增高，对该病的早期诊断显得尤为重要，目前的血清学诊断灵敏度与特异度并不高，随着分子生物学的发展，某些新型肿瘤相关基因表达的蛋白被应用于肿瘤的诊断[6]，我院为探讨CD147与CK20的检测对结直肠癌诊断的意义而展开了此次分析。 CD147参与机体多个生理过程，对细胞之间的黏附具有调节作用，而且有研究表明部分肿瘤组织中CD147的表达明显增加，有研究证明 CD147可诱导纤维细胞分泌MMP，且与肿瘤转移有关，CD147在原发肿瘤与低分化肿瘤组织中可以表达增加，促进肿瘤细胞的转移[7]。而CK20是一种细胞角蛋白，属于多肽类，是细胞骨架组成成分之一，组织特异性高；以往研究发现CK20在几乎所有的结直肠癌患者中的表达都升高，在发生转移与侵袭的组织中浓度可保持稳定，因此是一种很好的肿瘤标志物[8]。
本次研究我院选取了来我院治疗的93例结直肠癌患者，在手术切除肿瘤组织后进行CD147与CK20的检测，我们发现93例结直肠癌患者中有88.2%的患者CD147检测为阳性，89.4%的患者CK20检测为阳性，而在分析其他因素与这两个标志物表达的关系时我们发现，患者性别、年龄、肿瘤分期等因素对患者CD147与CK20检测阳性率并无多大影响[9]，这一结果也与以往研究结果相一致，同时我们分析表1与表2的数据我们发现结直肠癌发生转移侵润的患者与未发生转移侵润的患者其CD147与CK20检测阳性率却具有明显差异，这说明CD147与CK20的检测可以反映患者结直肠癌的转移侵润情况，因此在临床对患者CD147与CK20进行检测可以提高临床诊断的准确性，对指导治疗以及分析患者预后情况具有重要意义[10]。
综上所述，CD147与CK20是两种重要的结直肠癌肿瘤标志物，其组织特异性高，联合检测结直肠癌患者CD147与CK20的表达情况对结直肠癌的诊断治疗以及预后具有重要意义。
参考文献
[1] 宗海峰.结直肠癌筛查的研究现状[J].结直肠肛门外科，2013，47（26）：129—130
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[3] 王字玲.CD147的研究进展[J].生物技术通讯，2013，37（08）：245—246
[4] 郭琨.结直肠癌中CD147和CK20的表达及其临床意义[J].现代肿瘤医学，2013，61（33）：471—472
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[6] 许昕.血清癌胚抗原、糖类抗原19-9与结直肠癌预后的相关性分析[J].大连医科大学，2012，27（13）：814—815
[7] Raj GV，Moreno JG，Gomella LG，et a1.Utilization of polymerase chain reaction technology in the detection of sloid tumors.Cancer 1998；82：1419-1442
[8] 程海玉.外周血CK20 mRNA表达与结直肠癌临床病理和预后的关系[J].世界华人消化杂志，2012，36（17）：618—619
[9] 谢伟.CD147和MMP-9在结直肠癌组织中的表达及临床意义[J].临床肿瘤学杂志，2013，41（25）：948—949
[10] 苏秀兰.结直肠癌相关肿瘤标志物的研究进展[J].医学综述，2014，21（13）：319—320