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目的
检测1个重型血友病A(hemophilia A, HA)患者家系凝血因子Ⅷ基因(F8)的突变情况，明确F8基因的突变类型，为家系提供遗传咨询。
方法联合应用反向转变PCR(inverse-shifting PCR, IS-PCR)、二代测序技术(next generation sequencing, NGS)、多重连接探针扩增技术(multiplex ligation dependent probe amplification, MLPA)和短串联重复序列(short tandem repeat，STR)连锁分析等方法对1个重型血友病A家系先证者、携带者及胎儿进行分析。
结果IS-PCR结果显示先证者未发生F8基因第1内含子倒位(intron 1 inversion, Inv1)或第22内含子倒位(intron 22 inversion, Inv22)；NGS结果显示先证者F8基因未发生点突变以及小的插入缺失，但在NGS覆盖度分析中发现先证者F8基因第2外显子测序深度为0；MLPA结果显示先证者F8-E2缺失，先证者母亲为F8基因第2外显子杂合缺失携带者。另外连锁分析与其它几种方法相比较，出现了结果不一致的情况。
结论通过NGS确定1例F8基因第2外显子大片段缺失突变，血友病A家系F8基因连锁分析用于携带者筛查及产前诊断需慎重，多种方法联合分析可准确判断F8基因的突变情况。