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摘 要 目的：探讨血浆纤维蛋白原Bβ基因多态性与小儿重症感染的相关性。方法：采用酚-氯仿抽提法提取外周血基因组DNA，采用RFLP方法确定β纤维蛋白原-455A/G基因多态性，通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析。观察组与对照组之间进行逐个等位基因的比较，以相对危险度（OR）计算。结果：①观察组三种基因型分布频率中，AA基因型最高，AG基因型次之，GG基因型最低；等位基因分布频率中，观察组以A等位基因为主，对照组以G等位基因为主。有统计学意义。②肺炎合并心衰竭组FGBβ-455A/G基因型及频率与未合并心衰组有显著不同，经卡方检验有统计学意义。③小儿肺炎FGBβ-455A/G基因型，AA型发病相对危险度为9.25，GA型的发病相对危险度为1.25，GG型发病相对危险度为0.17。AA基因型可能是小儿肺炎的易感基因。结论：本研究提示FGBβ-455A/G基因型与小儿肺炎发病相关，与肺炎合并心衰亦有一定的相关性，推测FG B β-455A/G基因型可能与病情严重程度有关。
关键词 纤维蛋白原 基因 肺炎
资料与方法
观察组： 2003年1月～2005年10月在我院内科住院的感染患者共176例，男94例，女82例；年龄：3天～14岁，平均年龄3.90±1.15岁；病种包括新生儿肺炎22例，支气管肺炎95例，毛细支气管炎14例，肺炎支原体肺炎26例、小儿肠炎19例。诊断标准依照第六版《儿科学》。对照组：同一地区在门诊体检的健康儿童，共55例，年龄1个月～12岁，平均年龄4.5±2.9岁，男37例，女18例。
方法：①外周血基因组DNA提取：抽取外周静脉1ml，2%EDTA100μl抗凝，-20℃冰冻保存。②染色体DNA提取采用酚-氯仿抽提法。
③β纤维蛋白原-455A/G基因多态性的检测：PCR引物参照Mannuccci等方法设计。④PCR扩增。⑤扩增产物用HaeⅢ酶消化。
结 果
通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析：根据PCR片段的大小判断FGβ-455基因多态性。统计学分析方法： 采用直接记数法计算基因型和等位基因频率，两组间差异比较采用卡方（X2）检验。观察组与对照组之间进行逐个等位基因的比较，以相对危险度（OR）计算。
基因型：PCR扩增产物为一条446bp片段。PCR产物经HaeⅢ酶切后发现，三种基因片段。①FGBβ- 455GG型，产生348bp及98bp两个片段；②FGBβ-455AA型，仅有1个446bp片段；③FGBβ -455GA型，产物为446bp、348bp及98bp 3个片段。
FGBβ-455A/G基因型与等位基因频率分布：观察组与对照组比较，三种基因型及两种等位基因明显不同。观察组三种基因型分布频率为AA基因型最高，AG基因型次之，GG基因型最低；等位基因分布频率为观察组以A等位基因为主，对照组以G等位基因为主。经卡方检验差异有明显统计学意义。X2值分别为32.18(P<0.005)和45.89(P<0.005)。
FGBβ-455A/G基因型与疾病严重程度的相关性：小儿肺炎患者病情严重，常常出现心力衰竭。在观察组109例支气管肺炎和毛细支气管炎中合并心力衰竭的患儿有43例。我们对合并心力衰竭与未合并心衰者各基因型分布进行比较，心衰组AA、AG、GG基因型频率分别为0.488、0.302、0.209，A、G等位基因频率为63.95和36.05，较未合并心衰组有显著增高，经卡方检验有统计学意义（P＜0.01，P＜0.005）。
FGBβ-455A/G基因型与小儿肺炎发病的关系：在157例肺炎患儿和50例非肺炎小儿中FGBβ-455A/G基因AA型为74例、AG型61例、GG型72例。AA型发病相对危险度为9.25，GA型的发病相对危险度为1.25，GG型发病相对危险度为0.17。这说明FGBβ-455G/A与小儿肺炎的发生有关； AA基因型可能是小儿肺炎的易感基因。
讨 论
研究认为，感染的发生、发展与β-纤维蛋白原多态性有关。本组结果表明，感染组A等位基因频率及AA基因型频率较对照组明显增高。在患肺炎的患儿中FGβ-455 AA基因型明显高于GG、GA型，提示FGβ-455G/A基因与小儿肺炎发病相关，FGβ-455G/A基因可能是通过影响血浆纤维蛋白原的水平而发挥作用。肺炎患者中合并心衰组AA型基因频率明显高于未合并心衰组，说明FGβ-455G/A基因与肺炎合并心衰亦有一定相关，推测FGβ-455G/A基因型可能与病情严重程度有关。肺部病变广泛也使肺循环阻力增加，心肌受病原体毒素损害及严重毒血症和低氧血症引起的微循环障碍均可导致心力衰竭。
有研究认为，FG进入学循环后，刺激白细胞介素-6，引起疾病及急性炎症反应[1]，因而血浆FG 水平与感染及急性炎症的关系亦备受关注。有实验研究[1]显示ARDS（急性呼吸窘迫综合症）大鼠肺循环中FG水平持续升高且与病程有密切关系；另有临床调查显示，血浆FG浓度的升高与肺功能减退呈正相关。血浆FG浓度升高，COPD（慢性阻塞型肺病）住院危险相关系数随之增大。
有研究[2]发现，急性肺炎患者血浆FG水平，全血黏度均明显增高，提示纤维蛋白原可能参与了肺炎的形成。
根据我们的研究结果,纤维蛋白原β-455G/A基因与小儿感染性疾病相关，A等位基因及AA基因型可能是小儿感染发病的危险因素。而且AA型基因携带者更倾向于合并心力衰竭。提示β纤维蛋白原 455G/A基因多态性可能是小儿肺炎的发生及其严重程度的遗传易感因素。
参考文献
1 郭杰庭.血浆纤维蛋白原浓度增高并发肺功能减退并增加慢性阻塞性肺疾病的危险性.国外医学呼吸系统分册,2002，3
2 罗显荣,张小华,王林,叶小群.急性肺炎患者血液流变学分析.微循环血杂志，2002,12(2)：25-26
关键词 纤维蛋白原 基因 肺炎
资料与方法
观察组： 2003年1月～2005年10月在我院内科住院的感染患者共176例，男94例，女82例；年龄：3天～14岁，平均年龄3.90±1.15岁；病种包括新生儿肺炎22例，支气管肺炎95例，毛细支气管炎14例，肺炎支原体肺炎26例、小儿肠炎19例。诊断标准依照第六版《儿科学》。对照组：同一地区在门诊体检的健康儿童，共55例，年龄1个月～12岁，平均年龄4.5±2.9岁，男37例，女18例。
方法：①外周血基因组DNA提取：抽取外周静脉1ml，2%EDTA100μl抗凝，-20℃冰冻保存。②染色体DNA提取采用酚-氯仿抽提法。
③β纤维蛋白原-455A/G基因多态性的检测：PCR引物参照Mannuccci等方法设计。④PCR扩增。⑤扩增产物用HaeⅢ酶消化。
结 果
通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析：根据PCR片段的大小判断FGβ-455基因多态性。统计学分析方法： 采用直接记数法计算基因型和等位基因频率，两组间差异比较采用卡方（X2）检验。观察组与对照组之间进行逐个等位基因的比较，以相对危险度（OR）计算。
基因型：PCR扩增产物为一条446bp片段。PCR产物经HaeⅢ酶切后发现，三种基因片段。①FGBβ- 455GG型，产生348bp及98bp两个片段；②FGBβ-455AA型，仅有1个446bp片段；③FGBβ -455GA型，产物为446bp、348bp及98bp 3个片段。
FGBβ-455A/G基因型与等位基因频率分布：观察组与对照组比较，三种基因型及两种等位基因明显不同。观察组三种基因型分布频率为AA基因型最高，AG基因型次之，GG基因型最低；等位基因分布频率为观察组以A等位基因为主，对照组以G等位基因为主。经卡方检验差异有明显统计学意义。X2值分别为32.18(P<0.005)和45.89(P<0.005)。
FGBβ-455A/G基因型与疾病严重程度的相关性：小儿肺炎患者病情严重，常常出现心力衰竭。在观察组109例支气管肺炎和毛细支气管炎中合并心力衰竭的患儿有43例。我们对合并心力衰竭与未合并心衰者各基因型分布进行比较，心衰组AA、AG、GG基因型频率分别为0.488、0.302、0.209，A、G等位基因频率为63.95和36.05，较未合并心衰组有显著增高，经卡方检验有统计学意义（P＜0.01，P＜0.005）。
FGBβ-455A/G基因型与小儿肺炎发病的关系：在157例肺炎患儿和50例非肺炎小儿中FGBβ-455A/G基因AA型为74例、AG型61例、GG型72例。AA型发病相对危险度为9.25，GA型的发病相对危险度为1.25，GG型发病相对危险度为0.17。这说明FGBβ-455G/A与小儿肺炎的发生有关； AA基因型可能是小儿肺炎的易感基因。
讨 论
研究认为，感染的发生、发展与β-纤维蛋白原多态性有关。本组结果表明，感染组A等位基因频率及AA基因型频率较对照组明显增高。在患肺炎的患儿中FGβ-455 AA基因型明显高于GG、GA型，提示FGβ-455G/A基因与小儿肺炎发病相关，FGβ-455G/A基因可能是通过影响血浆纤维蛋白原的水平而发挥作用。肺炎患者中合并心衰组AA型基因频率明显高于未合并心衰组，说明FGβ-455G/A基因与肺炎合并心衰亦有一定相关，推测FGβ-455G/A基因型可能与病情严重程度有关。肺部病变广泛也使肺循环阻力增加，心肌受病原体毒素损害及严重毒血症和低氧血症引起的微循环障碍均可导致心力衰竭。
有研究认为，FG进入学循环后，刺激白细胞介素-6，引起疾病及急性炎症反应[1]，因而血浆FG 水平与感染及急性炎症的关系亦备受关注。有实验研究[1]显示ARDS（急性呼吸窘迫综合症）大鼠肺循环中FG水平持续升高且与病程有密切关系；另有临床调查显示，血浆FG浓度的升高与肺功能减退呈正相关。血浆FG浓度升高，COPD（慢性阻塞型肺病）住院危险相关系数随之增大。
有研究[2]发现，急性肺炎患者血浆FG水平，全血黏度均明显增高，提示纤维蛋白原可能参与了肺炎的形成。
根据我们的研究结果,纤维蛋白原β-455G/A基因与小儿感染性疾病相关，A等位基因及AA基因型可能是小儿感染发病的危险因素。而且AA型基因携带者更倾向于合并心力衰竭。提示β纤维蛋白原 455G/A基因多态性可能是小儿肺炎的发生及其严重程度的遗传易感因素。
参考文献
1 郭杰庭.血浆纤维蛋白原浓度增高并发肺功能减退并增加慢性阻塞性肺疾病的危险性.国外医学呼吸系统分册,2002，3
2 罗显荣,张小华,王林,叶小群.急性肺炎患者血液流变学分析.微循环血杂志，2002,12(2)：25-26