【摘 要】
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目的：构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌LoVo细胞检测其有效性. 方法：设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建
【机 构】
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110840 沈阳沈阳军区总医院全军肿瘤诊治中心
【出 处】
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2014第十届全国癌症康复与姑息医学大会
论文部分内容阅读
目的：构建人HIF-1α的miRNA特异性干扰表达载体并转染人结肠癌LoVo细胞检测其有效性.
方法：设计合成针对人HIF-1α基因的特异性miRNA前体寡核苷酸,依次通过退火、连接,构建含HIF-1α前体miRNA的重组干扰质粒pcDNA TM 6.2-GW/EmGFP-HIF-1α-miR,并转染人结肠癌LoVo细胞,经半定量RT-PCR技术鉴定其干扰有效性.结果经双酶切及测序鉴定,针对人HIF-1α基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,并能够有效抑制人结肠癌LoVo细胞中HIF-1αmRNA表达.
结论：成功构建针对人HTF-1α基因的miRNA特异性有效干扰质粒,为后续HIF-1α基因慢病毒miRNA表达载体的构建及其在结肠癌多药耐药中的相关功能研究奠定基础.
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