【摘 要】
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LEAFY(LFY)基因是花分生组织特异基因。在被子植物中,对LFY基因的研究已趋近完善。而对裸子植物中两个LFY基因的研究有待突破。本研究以裸子植物油松为材料,利用酵母双杂交和
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LEAFY(LFY)基因是花分生组织特异基因。在被子植物中,对LFY基因的研究已趋近完善。而对裸子植物中两个LFY基因的研究有待突破。本研究以裸子植物油松为材料,利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术,分别在细胞内外验证了油松PtLFY和PtNEEDLY(PtNLY)基因的相互作用关系,以及PtLFY/PtNLY与PtUFO1/PtUFO2的相互作用关系,并将PtLFY和PtNLX转基因到拟南芥植株中。研究结果如下:1.油松PtLFY和PtNLY能够产生相互作用,但相互作用的强度存在差异,表明它们能够协同发挥作用,但功能并非是完全冗余的。从油松中克隆了LFY的同源基因PtLFY和PtNLY,并利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术验证了PtLFY与PtNLY,和它们二者自身都能够产生相互作用,但是PtNLY自身相互作用强度强于PtLFY自身相互作用强度。2.油松两个LFY-like蛋白与UFO-like蛋白相互作用模式存在显著差异,其中B类基因的表达调控可能主要是由PtNLY调控的。从油松中克隆了两个UNUSUAL FLORAL ORGANS(UFO)同源基因PtUFO1和PtUFO2。利用酵母双杂交和双分子荧光互补技术验证了PtNLY与PtUFO1、PtUFO2存在相互作用关系;而PtLFY与PtUFO1、PtUF02不存在相互作用关系。表明在油松中,PtNLY是与UFO-like共同调控B类基因表达的主要基因。3.成功获得了35S::PtLFY和35S::PtNLY的T0代转基因种子,可以进行后续实验。利用转基因技术将35S组成型启动子转入到拟南芥中,得到35S::PtLFY和35S::PtNLY转基因植株的TO代转基因种子。
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