天然抗菌肽来源广泛,不仅来源于动植物,在昆虫中也广泛存在。蜂毒肽因其广谱高效的抑菌活性和低耐药性等特点逐渐引起国内外科学家的广泛关注。现阶段获取蜂毒肽的方案包括化学合成,蜂毒干粉粗提和基因工程方法。化学合成蜂毒肽成本高昂且耗费大量时间,从蜂毒干粉中提取蜂毒肽步骤繁多,产量少且纯度低,难以满足科研和临床需求。以基因工程表达的策略生产蜂毒肽,具有产量高,周期短,成本低,易纯化等诸多优势。为此,运用基因工程手段大量生产蜂毒肽是一种有效的方法。本研究通过合成SUMO-Melittin基因并构建到p ET3c表达载体,筛选出阳性重组表达质粒p ET3c-SUMO-Melittin。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中,并获得稳定高效表达。经验证,工程菌具有良好的传代稳定性和表达稳定性。对其表达条件进行优化,并按最佳表达条件进行大规模摇瓶培养。用Ni亲和层析纯化后,获得高纯度融合蛋白。Western blot鉴定后,经SUMO酶切后再次用Ni亲和层析纯化获得高纯度重组蜂毒肽。并对重组蜂毒肽的抑菌活性,溶血活性,细胞毒性和抗肿瘤活性进行检测。主要实验结果如下:（1）成功构建了重组表达质粒p ET3c-SUMO-Melittin,并在大肠杆菌中获得表达,最佳诱导时机为菌液OD₆₀₀=0.8时,IPTG终浓度为0.5 m M条件下37℃诱导5 h。（2）经Ni亲和层析纯化后,获得SUMO-Melittin融合蛋白,大小为21 k Da,用SUMO酶切后,再次经Ni亲和层析纯化,获得Melittin蛋白,经SDS-PAGE,质谱分析和HPLC分析,其分子量大小为2.84 k Da,且纯度大于95%。（3）纯化后的Melittin对大肠杆菌ATCC 25922,鼠伤寒沙门氏菌CMCC 50115,福氏志贺氏菌ATCC 12022,肺炎克雷伯CMCC 10031,金黄色葡萄球菌ATCC 25923和枯草杆菌ATCC 63501的MIC分别为16,8,16,32,2,32μg/m L。3.18μg/m L浓度的重组Melittin可以使5%人红细胞裂解,2.94μg/m L,3.49μg/m L和4.42μg/m L浓度的重组Melittin作用24h能杀死50%的RAW 264.7,HEK 293和NIH3T3细胞。4.36μg/m L和5.18μg/m L浓度的重组Melittin作用24h能杀死50%的Hela和HepG2细胞。