【摘 要】
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目的:构建靶向DJ-1的RNAi真核表达载体,观察DJ-1低表达对心肌细胞缺氧预适应(APC)延迟保护的影响,以求反向阐明DJ-1是否作为内源性保护蛋白通过其抗氧化应激作用参与心肌细胞APC延迟保护。方法:1、设计靶向DJ-1基因的3条候选RNA干扰序列,利用真核表达载体pGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,瞬时转染H9c2心肌样细胞后,RT-PCR和Western Blot检测DJ-1mRNA
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目的:构建靶向DJ-1的RNAi真核表达载体,观察DJ-1低表达对心肌细胞缺氧预适应(APC)延迟保护的影响,以求反向阐明DJ-1是否作为内源性保护蛋白通过其抗氧化应激作用参与心肌细胞APC延迟保护。方法:1、设计靶向DJ-1基因的3条候选RNA干扰序列,利用真核表达载体pGPU6/GFP/Neo构建重组质粒,瞬时转染H9c2心肌样细胞后,RT-PCR和Western Blot检测DJ-1mRNA和蛋白表达,筛选最有效的RNA干扰靶片段用于后续细胞实验;2、 H9c2心肌样细胞随机分
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