论文部分内容阅读
子宫内膜癌是女性生殖道常见三大恶性肿瘤之一,子宫内膜癌占女性总癌瘤7%,占女性生殖器恶性肿瘤的20%~30%,居妇科恶性肿瘤第2位,近20年来在世界范围内子宫内膜癌发病率有上升趋势。影响子宫内膜癌预后的因素包括:手术-病理分期,组织学类型及分级,肌层浸润深度,淋巴结转移及腹腔液细胞学检查,治疗方案等。经手术为主,放疗、化疗、内分泌治疗为辅的综合治疗,子宫内膜癌总的五年生存率为60%-70%,晚期患者的五年生存率不到30%。越来越多的学者提出综合治疗,个体化治疗的理念。寻求新的药物也得到人们的重视。
维甲酸类药物近年来在临床上广泛用于治疗白血病,也已经用于消化系统肿瘤的治疗,与5-FU联用,用于肝癌的治疗已初见成效。维甲酸对子宫内膜癌细胞的作用却鲜有报道。
肝细胞生长因子(HGF)是一个多功能生长因子。HGF的单一受体c-met是一跨膜蛋白,由原癌基因C-met编码。在甲状腺癌、胃癌、肠癌、卵巢癌、胰腺癌、肾癌、乳腺癌、前列腺癌子宫内膜癌中C-Met被过表达。HGF/C-Met系统被认为与肿瘤的增生、浸润、转移有关。在恶性肿瘤中C-Met表达的水平与外科分级,组织学分级及短生存率有关。阻断HGF/C-met系统的表达或信号转导通路将为肿瘤治疗提供新的思路。
目的:
通过观察HGF、ATRA(反式维甲酸)对子宫内膜癌细胞HEC-2B增殖的影响及检测子宫内膜癌细胞HEC-2B中HGF受体C-Met表达,了解维甲酸对子宫内膜癌细胞的作用及其可能机制。
材料与方法:
1.体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-2B。
2.用不同剂量的HGF及ATRA作用于HEC-2B。
3.MTT的方法分析细胞的增殖力。
4.用流式细胞仪检测细胞的增殖周期。
5.RT-PCR技术检测ATRA作用前后细胞中HGF受体C-Met的表达。
6.统计学分析:采用t检验的方法,P<0.05时具有统计学意义。
结果:
1.HGF 促进细胞的增殖并表现为剂量依赖关系,各处理组与对照组相比,p<0.05.当HGF浓度达到60ng/ml时,增殖水平较对照上调约1.9倍。
2.C-Met在HEC-2B细胞中表达。
3.单独使用ATRA(10<-6>M)处理HEC-2B,并不能够影响细胞的增殖能力。但是,如果与具有明显促细胞增殖作用的60ng/ml HGF共处理,10<-7>M的ATRA即能够明显抑制前者的促增殖作用(p<0.01),而且表现出一定的量效关系。
4.ATRA能够有效抑制HEC-2B细胞中C-Met的转录水平。10<-7>M的ATRA即有明显作用(p<0.01),10<-6>M的作用最为显著(p<0.01)。有呈现一定的量效关系。经ATRA处理0.5h后,C-Met的转录水平即开始下降,随着处理时间的延长,ATRA的抑制作用趋于明显(p<0.01),有明显的时间依赖性。
讨论:
1.C-Met在子宫内膜癌细胞中的表达。
2.HGF促进子宫内膜癌细胞的增殖。
3.HGF/C-Met在子宫内膜与子宫内膜癌发生发展过程中的作用。
4.ATRA与子宫内膜癌的关系。
结论:
1.子宫内膜癌细胞HEC-2B 中存在C-Met受体,C-Met在子宫内膜癌细胞中能稳定的表达。
2.HGF/C-Met能够在体内外促进子宫内膜癌细胞的增殖。
3.通过抑制c-met的表达调控细胞的增殖可能是维甲酸对子宫内膜癌细胞作用的通路之一。
4.维甲酸有希望成为治疗子宫内膜癌的药物之一。