金丝桃素新制剂在体外抗AIV的研究

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:txl8909
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本研究首先采用Klein-Defors悬浮杀灭方法,进行金丝桃素新制剂对低致病力H9N2亚型AIV的杀灭效果实验。选取1520枚10日龄SPF鸡胚,分为金丝桃素新制剂给药组(760枚鸡胚)、利巴韦林对照组(608枚鸡胚)和阳性对照组(152枚鸡胚)。根据药物浓度的不同,又将金丝桃素新制剂组分为5个小组,利巴韦林对照组分为4个小组。为了观察不同作用时间金丝桃素新制剂对病毒的杀灭效果,再将上述各小组分为两组,一组是将药物与病毒的混合液作用10min后尿囊腔接种鸡胚,另一组是将混合液作用30min后尿囊腔接种鸡胚。采集尿囊液进行血凝试验,并计算药物对这两种病毒的杀灭率。结果表明,0.0005mg/ml~0.34mg/ml浓度范围内的金丝桃素新制剂与H9N2亚型低致病力AIV作用30min,对其杀灭率分别为0,0,93.23%,99.99%,99.99%;作用10min,对其杀灭率分别为0,0,93.23%,99.99%,99.99%。此结果显示,金丝桃素新制剂浓度达到0.0136 mg/ml时对低致病力H9N2亚型AIV具有很好的杀灭作用,且作用时间对杀灭效果几乎没有影响。为了确定金丝桃素新制剂对高致病力AIV是否亦具有很好的杀灭作用,又选用1440枚10日龄SPF鸡胚,采用与上述相同的实验方法、鸡胚分组方法及处理情况,进行金丝桃素新制剂对H5N1亚型AIV的杀灭效果实验。结果表明,0.0005mg/ml~0.34mg/ml浓度范围的金丝桃素新制剂与H5N1亚型AIV作用10min,对AIV的杀灭率分别为0,0,94.37%,99.99%,99.99%;作用30min,对H5N1亚型AIV的杀灭率分别为0,32.39%,95.42%,99.99%,100%。此结果显示,金丝桃素新制剂对高致病力H5N1亚型AIV的杀灭作用与浓度和作用时间均有密切的关系,即浓度越大、作用时间越长,其杀灭作用越强。为了进一步明确金丝桃素新制剂通过不同给药方式对AIV的杀灭效果,本研究选用H5N1亚型高致病力AIV,进行体外抗病毒试验。选取162枚10日龄SPF鸡胚,根据作用方式的不同,平均分为3组(即感染病毒同时给药组、给药后接种病毒组、先感染病毒后给药组,每组54枚鸡胚),再将每组都设金丝桃素新制剂组(依据其浓度不同,将鸡胚平均分为5组,每组9枚鸡胚)和阳性对照组(9枚鸡胚)。通过测定鸡胚尿囊液的血凝效价和计算药物对感染鸡胚的保护率,判定金丝桃素新制剂抗H5N1亚型AIV的活性。实验结果表明:(1)第一种方式即药物在体外与病毒作用一段时间后再将其混合悬液接种鸡胚,药物浓度在0.5mg/ml以上时,对感染鸡胚的保护
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