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目的：通过体外细胞实验与体内动物实验，观察马钱子碱免疫纳米微粒对高转移潜能人肝癌细胞生长、侵袭和转移作用的影n向，初步揭示马钱予碱免疫纳米微粒影响月十癌细胞生长、侵袭和转移的作用机制，为肝癌复发转移的防治提供理论依据和新的治疗方法。 方法：依据实验要求实验分为8组：生理盐水组、聚乙二醇.聚乳酸嵌段共聚物组、抗AFPMcAb组、抗AFPMcA聚乙二醇.聚乳酸嵌段共聚物组、5-FU组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组、马钱子碱免疫纳米微粒组。通过以下方法进行研究：1)体外培养高转移潜能人肝癌细胞HCC-LM3，MTT方法观察马钱子碱免疫纳米微粒对体外培养的人肝癌细胞HCC-LM3生长抑制作用；ELISA和WesternBlot检测马钱子碱免疫纳米微粒作用人肝癌细胞HCC-LM3后培养液上清与肝癌细胞ALB与AFP蛋白水平，观察马钱子碱免疫纳米微粒对高转移潜能人肝癌细胞HCC-LM3的恶性逆转作用。2)建立裸鼠高转移潜能人肝癌HCC-LM3细胞原位移植肝癌模型，各组经尾静脉给药后，在预定时间内分别处死动物，观察肝肿瘤生长与肝内、肺、腹腔等脏器转移情况，病理观察肿瘤大小、数目，并观察此免疫纳米微粒对肝癌裸鼠生存期的影响。3)采用O-RT-PCR和WesternBlot方法分别测定肝肿瘤组织与肿瘤侵袭转移相关因子E-Cadherin/β-Catenin、MMP-9/TIMP-1和VEGFtuRNA和蛋白表达，初步探讨马钱子碱免疫纳米微粒抗高转移潜能肝癌侵袭转移机制。 结果：1)肝癌细胞生长抑制作用：阴性对照各组对高转移潜能人肝癌细胞HCC-LM3的生长均无明显抑制作用，组间差异无统计学意义(P>0.05)。5.FU组等阳性实验组对高转移潜能人肝癌细胞HCC-LM3生长具有明显抑制作用，组间差异具有统计学意义(P<0.05)，且随药物浓度的增加抑制作用呈递增趋势，具有浓度依赖性。马钱子碱免疫纳米微粒对高转移潜能人肝癌细胞HCC-LM3的抑制作用与5-FU接近(5-FU组IC50为22.63±1.53μg/ml：马钱子碱免疫纳米微粒组IC50为22.48±1.36μg/ml)。2)肝癌细胞恶性逆转作用：培养液上清及肝癌细胞HCC-LM3ALB、AFP蛋白表达阴性对照各组间比较差异无统计学意义(F=0.782，0.467，P>0.05.F=0.998，0.770，P>0.05)。5-FU组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组、马钱子碱免疫纳米微粒组与DMEM组比较，培养液上清及肝癌细胞HCC-LM3ALB、AFP蛋白水平差异有统计学意义(F=132.271，193.627，P<0.05；F=8.552，106.079，P<0.05)。与马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组比较，马钱子碱免疫纳米微粒显著增加HCC-LM3肝癌细胞上清液和肝癌细胞ALB蛋白表达，抑制HCC-LM3肝癌细肥上清液和肝癌细胞AFP蛋白表达，差异具有统计学意义(F=60.237，113.958，P<0.05.F=5.031，65.823，P<0.05)。与5-FU组比较，马钱子碱免疫纳米微粒组上清液与肝癌细胞ALB和AFP蛋白水平差异无统计学意义(F=60.237，113.958，P>0.05；F=5.031，65.823，P>0.05)。3)肿瘤转移：给药5w后阴性对照各组间比较肝、肺及腹腔肿瘤转移数无统计学意义(F=1.813，0.740，0.026，P>0.05)。5-FU组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组、马钱子碱免疫纳米微粒组与生理盐水组比较具有统计学意义(F=132.375，45.160，32.385，P<0.01)，马钱子碱免疫纳米微粒显著抑制肿瘤肝、肺和腹腔转移，与5-FU组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组比较差异具有统计学意义(F=39.344，4.373，17.103，P<0.05)。4)抑瘤率和生存期观察：给药5w后5-Fu组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组与马钱子碱免疫纳米微粒组不同程度抑制肿瘤生长，抑瘤率(TIR)均有所增加，其中马钱子碱免疫纳米微粒抑制肿瘤生长作用最强，5-Fu组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组与马钱子碱免疫纳米微粒组抑瘤率分别为57.71％、44.58％、48.15％和75.47％，而阴性对照各组无明显肿瘤抑制作用。与阴性对照各组比较，5-Fu组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组、马钱子碱免疫纳米微粒组荷瘤裸鼠生存时间明显延长，生存时间分别为62±6.38d、39.7±3.95d、55.8±6.20d、71.1±4.46d，其中以马钱子碱免疫纳米微粒组生存时间延长最明显(F=68.199，P<0.01)。5)肿瘤侵袭转移相关因子表达：阴性对照各组肿瘤组织VEGF、E-eadherin、β-catenin、MMP-9和TIMP-1mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义(F=0.207，0.299，0.633，1.349，1.049，P>0.05；F=0.575，0.071，0.420，0.927，1.263，P>0.05)。马钱子碱免疫纳米微显著抑制肿瘤组织VEGF、MMP-9mRNA和蛋白表达，与5-Fu组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组比较，差异均有统计学意义(F=70.589，8.625，P<0.01；F=9.258，10.822，P<0.01)。马钱子碱免疫纳米微粒增强肿瘤组织E-cadherinmRNA和蛋白表达，与5-Fu组、马钱子碱组、马钱子碱纳米微粒组比较，差异均有统计学意义(F=7.047，53.848，P<0.05)。阳性各组组间比较，肿瘤组织中β-catenin、TIMP-1mRNA和蛋白表达差异无统计学意义(F=1.369，0.162，P>0.05；F=1.115，1.045，P>0.05)。 结论：1)马钱子碱免疫纳米微粒具有显著抑制高转移潜能人肝癌细胞生长及逆转其恶性表型的作用；2)马钱子碱免疫纳米微粒显著抑制高转移潜能肝癌肿瘤生长与侵袭转移，显著延长荷瘤动物生存时间。3)马钱子碱免疫纳米微粒抗高转移潜能肝癌生长和侵袭转移与血管新生因子、细胞粘附因子及细胞外基质相关因子VEGF、MMP-9表达下调、E-cadherin表达上调有关。4)马钱子碱免疫纳米微粒是一种具有潜在应用前景的抗肝癌免疫靶向药物，为肝细胞癌的治疗及侵袭转移的防治提供新的治疗方法。