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目的：探讨miR-21-5p是否具有抗人AT-Ⅱ凋亡作用，并验证直接作用于miR-21-5p的靶基因。 方法：1、将人肺泡II型上皮细胞分为A组（空白对照组：直接培养）、B组（H2O2损伤组：加入0.5mmol/L H2O2培养）、C组（miR-21-5p慢病毒过表达载体+0.5mmol/L H2O2培养）、D组（慢病毒空白载体+0.5mmol/L H2O2培养）。分别于0h、12h、24h、36h、48h进行CCK8细胞增殖活力检测，了解A、B、C、D四组细胞增殖活力情况。2、各组于培养24小时后进行流式细胞检测，比较A、B、C、D四组细胞凋亡率。3、Western blot检测和Real time PCR检测：比较A、B、C、D四组间PDCD4 miRNA的表达变化，进一步明确miR-21-5p与PDCD4的相关性。4、双荧光素酶报告基因检测：空病毒细胞组与过表达miR-21-5p细胞组在转染48h后，将构建好的目的报告基因PDCD4自然序列（野生型）和PDCD4突变序列（突变型）插入细胞启动子片段（插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因），使用自动发光检测仪读取荧光强度，比较野生型与突变型的荧光强度，探讨miR-21-5p是否直接作用于PDCD4，验证miR-21-5p靶基因是否为PDCD4。 结果：1、CCK8细胞增殖活力从0h-48h之间，随着时间的延长，A组的细胞增殖活力逐渐增强，B、C、D三组的细胞增殖活力逐渐下降（p＜0.05）,C组细胞增殖活力下降程度较B、D缓慢（p＜0.05），说明miR-21-5p过表达后细胞具有抗凋亡作用。2、流式细胞检测细胞凋亡率：与A组比较，B、C、D三组的细胞凋亡率有所增加，而C组的细胞凋亡率较B、D两组低（P＜0.05）。3、Western blot检测和Real time PCR检测：A组PDCD4 miRNA表达量＜B、C、D三组（P＜0.05），C组PDCD4 miRNA表达量＜B、D两组（P＜0.05），与B组与D组比较无统计学差异。4、双荧光素酶报告基因检测：野生型过表达miR-21-5p细胞组（构建自然序列PDCD4片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因），使荧光相对强度下降（P＜0.05）；野生型空病毒细胞组、突变型空病毒细胞组以及突变型过表达miR-21-5p细胞组（PDCD4突变序列插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因），后三组荧光相对强度无明显变化。 结论：1、随着时间的延长（0h-48h），未予干扰直接培养的细胞增殖活力逐渐增强，而经过加入0.5mmol/L H2O2培养、miR-21-5p慢病毒过表达载体+0.5mmol/L H2O2培养和慢病毒空白载体+0.5mmol/L H2O2培养的细胞增殖活力逐渐下降，说明H2O2及慢病毒均加快细胞损伤，其中miR-21-5p慢病毒过表达载体+0.5mmol/L H2O2培养的细胞增殖活力下降较其他细胞组缓慢，miR-21-5p具有减轻细胞凋亡作用。 miR-21-5p过表达后的细胞组凋亡率较 H2O2损伤组和空病毒组下降，miR-21-5p具有抗凋亡作用。2、miR-21-5p慢病毒过表达后PDCD4表达量下降，野生型过表达miR-21-5p细胞组相对荧光强度减低，证明miR-21-5p靶向作用于PDCD4，即miR-21-5p靶基因为PDCD4。