【摘 要】
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目的:本研究的主要目的是探讨PPARγ调控脑缺血再灌注损伤后血管平滑肌表型转化的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组和缺血再灌注（Ischemia reperfusion,IR）12h、24h、48h、72h组,IR组采用大脑中动脉闭塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）的方法来构建,正常组及48h组8只大鼠,其余各组5只。通过Western blot
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目的:本研究的主要目的是探讨PPARγ调控脑缺血再灌注损伤后血管平滑肌表型转化的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组和缺血再灌注（Ischemia reperfusion,IR）12h、24h、48h、72h组,IR组采用大脑中动脉闭塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）的方法来构建,正常组及48h组8只大鼠,其余各组5只。通过Western blotting测定Willis环附近血管组织中PPARγ、ERK1/2、α-SMA和MYH10的表达,并通过Zea-Longa量表评估神经功能缺损及其程度,HE染色观察正常组和48h组的动脉直径和壁厚的变化,用免疫荧光染色技术测定大鼠大脑中血管平滑肌的表型转换情况。筛选出缺血再灌注48h,予吡格列酮干预,分为正常组、假手术组、MACO模型48h组和MACO模型48h吡格列酮干预组,48h及干预组7只大鼠,其余各组6只。每组进一步研究PPARγ对脑缺血再灌注后血管平滑肌表型转化的调节机制。同时采用Zea-Longa量表评估神经功能障碍及其程度,TTC（Triphenyltetrazolium chloride）染色测定大鼠是否有脑梗死灶及范围大小,并通过Western blotting测定各组Willis环附近血管脑组织中PPARγ、ERK1/2、α-SMA和MYH10的表达,使用免疫荧光染色技术测定MACO模型48h组、MACO模型48h吡格列酮干预组大鼠大脑中血管平滑肌表型转化情况。结果:1.Zea-Longa评分结果:除正常组、假手术组大鼠评分为0分外,缺血再灌注48h组中评分在2.60±0.45分之间,吡格列酮干预组评分在1.80±0.45分之间,其评分降低,并有统计学意义（P＜0.05）。2.HE染色结果:正常组大鼠脑血管平滑肌细胞结构正常,细胞核形态规则、大小正常,血管管径及管壁厚度未见明显改变。缺血再灌注48h组大鼠脑血管平滑肌细胞可见明显肿胀,核缩小、凝聚,血管管径变窄、管壁增厚,周围组织水肿。3.TTC染色结果:除正常组、假手术组无梗死灶外,缺血再灌注48h组中脑梗死体积比最大,吡格列酮干预组的梗死体积比相对减少。4.免疫荧光染色结果:正常组大鼠大脑血管血管组织中α-SMA表达较多,MYH10表达较少,在48h组大鼠大脑动脉血管组织中α-SMA表达较少,MYH10表达较多;使用吡格列酮干预后,48h组大鼠大脑动脉血管组织中α-SMA表达增加,MYH10表达减少。5.Western blotting结果:大鼠脑缺血再灌注后PPARγ、ERK1/2、α-SMA与MYH10在Willis环附近血管组织中的表达存在动态变化,与正常组比较,缺血再灌注后PPARγ与ERK1/2的表达水平出现升高,在缺血再灌注后48h达到峰值,随后开始回落,α-SMA在正常组表达最多,缺血再灌注后表达显著下降,MYH10在正常组表达最少,缺血再灌注后表达明显增加,各组与正常组相比有统计学意义（P＜0.05）;使用吡格列酮干预后,48h组大鼠Willis环附近血管组织中PPARγ的表达较无干预48h组显著升高,ERK1/2表达下降,α-SMA的表达也有着明显升高,MYH10表达减少,其差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:使用PPARγ激动剂将PPARγ激活后,ERK1/2通路受到了抑制,血管平滑肌收缩型表型标志物α-SMA表达增加,合成型表型标志物MYH10表达减少,大鼠缺血再灌注损伤减轻,其机制可能是通过激活PPARγ后抑制ERK1/2信号通路,抑制血管平滑肌的表型转化,从而发挥神经血管保护作用有关。
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