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目的探讨缺氧条件对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭能力、上皮间质转化、细胞外基质、Hippo信号通路的影响,以及沉默HIF-1α对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响以及作用机制,为临床上进一步预防、治疗胰腺癌提供理论依据。方法1、将胰腺癌PANC-1细胞分为对照组和缺氧组,分别在常氧(5%CO2、95%O2)和缺氧(5%CO2、2%O2、93%N2)条件下培养24h,采用Transwell小室和细胞划痕实验检测胰腺癌细胞迁移能力的变化;Western blot和q RT-PCR技术检测上皮细胞间充质化(EMT)相关蛋白、MMP2和MMP-9、Hippo信号通路相关蛋白的表达水平;2、将PANC-1细胞分为对照组、缺氧组、缺氧空转组、缺氧干扰组。通过脂质体瞬时转染法将Si RNA、Si RNA HIF-1α转入胰腺癌细胞中,Western blot检测转染效果。采用细胞划痕和Transwell小室检测胰腺癌细胞迁移能力和侵袭能力的变化;Western blot检测EMT相关蛋白以及MMP2、MMP-9、Hippo信号通路相关蛋白的表达水平;3、实验结果采用SPSS22.0进行t检验和单因素方差分析,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果1、缺氧组:(1)细胞划痕面积、迁移细胞数、侵袭细胞数高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)E-cadherin蛋白和m RNA表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(3)Vimentin蛋白和m RNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(4)MMP-2、MMP-9蛋白和m RNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)(5)TEAD蛋白表达量高于对照组,p YAP蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2、与对照组相比,缺氧组和空转组HIF-1α蛋白的表达量高于对照组,缺氧干扰组HIF-1α蛋白水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。3、缺氧干扰组:(1)划痕面积、迁移细胞数、侵袭细胞数低于缺氧空转组,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)Ecadherin蛋白表达量高于缺氧空转组,Vimentin蛋白表达量低于缺氧空转组,差异均有统计学意义(P<0.05);(4)MMP-2、MMP-9蛋白表达量低于缺氧空转组,差异具有统计学意义(P<0.05);(5)TEAD、p YAP蛋白表达量与缺氧空转组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论1、缺氧可促进胰腺癌细胞的侵袭、迁移能力,增强胰腺癌细胞HIF-1α高表达,该作用可能通过影响EMT、MMPs、Hippo信号通路实现;2、缺氧条件下沉默HIF-1α表达,可以降低胰腺癌细胞的侵袭、迁移能力。该过程,可能与通过EMT、MMPs调整肿瘤重构有关。图15幅;表11个;参155篇。