泥鳅（Misgurnus anguillicaudatus）,属硬骨鱼纲（Osteichthyes）鲤形目（Cypriniformes）鳅科（Cobitidae）鳅属（Misgurnus）,为底栖鱼类,在全国各地天然淡水水域中均有分布对环境适应性强。菲（phenanthrene,PHE）是一种典型多环芳烃类污染物,对水生生物具有极高毒性,可能会对水体环境造成长期污染。然而,目前有关PHE对泥鳅的毒性效应机制研究较少,尤其是有关性腺发育的响应过程鲜少报道。本研究以泥鳅为受试对象,对PHE暴露下泥鳅肝脏、性腺组织中卵黄蛋白原（vitellogenin,VTG）的变化进行q PCR实验及ELISA检测,并利用二代测序技术从转录组水平探讨泥鳅性腺对PHE暴露的毒理学响应机制,筛选差异水平较显著的性腺发育相关基因,为探索PHE暴露对水生生物毒性作用提供基础性数据,也为进一步研究外源雌激素干扰鱼类性腺发育相关基因表达模式,深入探索其对鱼类生殖毒性研究提供基础性数据和思路。主要结论如下:1.利用不同浓度(1.33、1.77、2.36、3.13 mg·L-1)的PHE并结合不同的处理时间（7、14、28d）,采用称重法测定肝脏指数、性腺指数;采用q PCR法检测卵黄蛋白原基因（vtg1、vtgc）在泥鳅肝脏和性腺的转录水平;采用酶联免疫吸附法测定卵黄蛋白原含量。结果显示:（1）PHE胁迫使雄性泥鳅肝脏指数升高、性腺指数下降;高浓度PHE胁迫引起雌性泥鳅肝脏指数上升,性腺指数升高。（2）PHE胁迫导致泥鳅vtg1和vtgc表达量显著升高,雄性泥鳅vtg1和vtgc转录水平与菲胁迫浓度之间呈现低浓度诱导、高浓度抑制的趋势。（3）PHE暴露使泥鳅肝脏、性腺VTG含量显著升高,且在PHE较高浓度组中尤为明显。提示:一定浓度PHE暴露可以导致泥鳅肝脏和性腺发育异常;较低浓度PHE暴露可诱导肝脏和性腺vtg1、vtgc转录水平的表达,而高浓度PHE则抑制上述基因表达,PHE胁迫引起vtg1和vtgc表达水平存在差异;PHE可以显著诱导肝脏和性腺VTG的产生。2.选取3.00 mg·L-1PHE浓度组处理30d的泥鳅性腺进行转录组测序并检测显著差异基因的表达,将泥鳅暴露于PHE浓度为0.30、1.00、3.00 mg·L-1的水体中60d,分析PHE暴露下泥鳅存活率降低,且呈浓度依赖型下降。转录组测序结果显示,PHE处理组与对照组筛选出5329个差异表达基因,其中2928个上调、2401个下调。减数分裂细胞周期、细胞器裂变、ATP酶活性、腺苷核苷酸结合等GO Terms显著富集,KEGG通路分析发现,TNF信号通路、CAMs、细胞色素P450代谢、脂质代谢等通路受到显著影响。在所选取的精巢发育相关因子分析中,这些基因表达在PHE胁迫下都存在不同程度的差异,dmc1在亚急性毒性实验中被PHE显著诱导,而其他基因的表达水平（piwil2、vasa、ubr2、dnd、rnf17）则被显著抑制。这些差异表达基因可能通过调控生殖细胞凋亡、精子形成、减数分裂时期的初级精母细胞和次级精母细胞,影响泥鳅精巢细胞结构和功能受损。3.利用二代测序平台构建PHE处理后雌性泥鳅卵巢的转录组文库,结果显示,共筛选出278个差异表达基因,其中上调表达基因有168个,主要是免疫反应、细胞因子受体互作相关基因,下调基因有110个,主要是蛋白结合、脂肪酸代谢相关基因。这些差异表达基因在GO数据库中富集1638个类别,主要参与粘附作用、分子结合、信号传导等过程,KEGG分析富集到27个通路,包括PI3K-Akt信号通路、RAS信号通路、HIF-1信号通路等。在筛选出的差异表达基因中选择6个具有代表性的进行q PCR分析,发现il-6、pcbp2表达水平显著上调,vcam1、atp6、opn1b、itga2表达水平显著下调。这些差异基因可能通过活化生物体先天性免疫反应,干扰氧化磷酸化、蛋白合成来参与泥鳅卵巢组织对PHE的响应。综上,PHE暴露诱导泥鳅卵黄蛋白原含量上升、vtg1与vtgc基因表达上调,性腺转录组分析结果发现PHE暴露下泥鳅免疫、炎症反应,性腺发育相关基因和代谢通路发生显著变化,在一定程度上说明泥鳅对PHE胁迫的响应机制。