论文部分内容阅读
目前,环境雌激素（Environmental Estrogens,EEs）对人类和野生生物的有害影响引起了许多国际组织和世界各国政府的关注,成为本世纪环境科学的重大议题之一。本课题拟优化重组酵母测评系统（Recombinant yeast estrogen system,RYES）并将其用于检测几类环境物质的雌激素活性,在此基础上利用该方法和子宫增重试验（Uterus Growth assay）,从体内和体外两个方面评价环境雌激素的联合作用。 重组酵母测评系统具有灵敏、简便、快速、经济等优点,应用前景十分广泛。目前该方法还处于继续完善和发展阶段,有必要对方法进行优化研究。本课题采用己烯雌酚（Diethylstilbestrol,DES）和壬基酚（4-nonyphenol,4-NP）作为受试物,研究振荡与非振荡、酵母扩增时间、受试物作用时间（染毒时间）以及裂解方式等因素对雌激素活性的影响,优化实验条件,并检测多氯联苯（PCBs）、异黄酮（Genistein,GS）、拟除虫菊酯农药、葛根粗提取物等几类环境物质的雌激素活性,以验证优化后方法的稳定性和实用性,促进其推广应用。结果显示:振荡条件不会影响雌激素活性,酵母扩增时间对雌激素活性有一定的影响,受试物作用时间和裂解方式对雌激素活性影响最大,运用该方法检测环境雌激素的优化组合为:孵箱扩增酵母30h,受试物作用时间30h,Y-PER裂解酵母细胞;优化后的重组酵母测评系统可用于外源性化学物的初筛,在被检测的环境物质中,异黄酮和葛根粗提取物具有强雌激素活性,汽油燃烧汽车尾气具有弱雌激素活性,而其它受试物在本实验条件下均未检出雌激素活性。 将己烯雌酚（Diethylstilbestrol,DES）、双酚A（Bisphenol A,BPA）、壬基酚（4-nonyphenol,4-NP）和苯甲酸雌二醇（Estradiol Benzoate,E2B）以不同的组合混合后,采用优化的重组酵母测评系统检测混合物的雌激素样作用。结果显示:这4种物质在单独作用时均表现出了雌激素样作用,且呈