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线粒体抗病毒信号蛋白（mitochondrial antiviral signaling adaptor,MAVS）是模式识别受体RIG样受体（retinoic acid inducible gene I（RIG-I）-like receptors,RLRs）的接头蛋白,在脊椎动物的抗病毒免疫相关信号通路中发挥重要作用。值得注意的是,近年来还在硬骨鱼类中发现了MAVS异构体的存在,有关硬骨鱼类MAVS及其异构体在宿主免疫反应中的作用越来越受到人们的广泛关注。肿瘤坏死因子受体相关因子5（TNF receptor-associated factor 5,TRAF5）能与MAVS相互作用并参与细胞信号转导,在MAVS介导的抗病毒免疫信号通路中发挥重要功能。本研究以大黄鱼为研究对象,克隆鉴定了MAVS、TRAF5及其异构体,通过荧光定量PCR检测了MAVS、TRAF5及其异构体在健康大黄鱼各组织以及不同病原相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）刺激下的表达模式,利用荧光示踪质粒揭示了它们的亚细胞定位,并通过双荧光素酶报告基因检测技术初步解析了MAVS、TRAF5及其异构体的免疫功能以及在介导宿主细胞信号转导通路中的作用。本研究克隆鉴定了大黄鱼MAVS及其异构体,分别命名为Lc-MAVS＿tv1和LcMAVS＿tv2。Lc-MAVS＿tv1蛋白分子由caspase激活与募集域（caspase activation and recruitment domains,CARD）、富含脯氨酸结构域（roline-rich region,PRR）以及跨膜结构域（trans-membrane domain,TM）组成,而Lc-MAVS＿tv2缺失了TM结构域。在健康大黄鱼中,Lc-MAVS＿tv1表达水平远高于Lc-MAVS＿tv2,且在大黄鱼鳃、脾脏和头肾中Lc-MAVS＿tv1及Lc-MAVS＿tv2的表达水平在poly I:C、LPS、PGN刺激和变形假单胞菌感染刺激下均显著上调,提示Lc-MAVS＿tv1及Lc-MAVS＿tv2均能参与宿主的免疫反应。亚细胞定位分析结果表明Lc-MAVS＿tv1主要定位于线粒体,而Lc-MAVS＿tv2则在胞浆中均匀分布。此外,Lc-MAVS＿tv1与Lc-MAVS＿tv2过表达均能诱导核转录因子κB（nuclear transcription factor-κB,NF-κB）启动子活化,且Lc-MAVS＿tv2的诱导活性显著高于Lc-MAVS＿tv1;Lc-MAVS＿tv1过表达能诱导干扰素调节因子3（interferon regulatory factor 3,IRF3）启动子活化,但LcMAVS＿tv2的过表达则无法诱导IRF3启动子的激活;值得注意的是Lc-MAVS＿tv1与LcMAVS＿tv2共表达对NF-κB和IRF3启动子的诱导活性显著高于两者单转的诱导活性。此外,Lc-MAVS＿tv1、Lc-MAVS＿tv2与TRAF3/5/6在对NF-κB启动子的诱导激活中均有协同作用,且Lc-MAVS＿tv2与TRAF3/5/6共表达的诱导活性显著高于Lc-MAVS＿tv1;但LcMAVS＿tv2会显著的抑制TRAF3/5/6对IRF3启动子的诱导活性,说明Lc-MAVS＿tv2可能对大黄鱼TRAF3/5/6介导的IRF3信号通路的激活具有负调控作用。本研究还克隆鉴定了大黄鱼TRAF5及其异构体,分别命名为Lc-TRAF5＿tv1和LcTRAF5＿tv2。Lc-TRAF5＿tv1蛋白分子包含环指蛋白结构域（RING Finger domain）、锌指蛋白结构域（Zinc Finger domain）、卷曲螺旋结构域（coiled coil domain）和MATH结构域（Meprin and TRAF-homology domain）,而Lc-TRAF5＿tv2仅包含RING Finger结构域。在健康大黄鱼中,Lc-TRAF5＿tv1表达水平远高于Lc-TRAF5＿tv2,且在大黄鱼鳃、肠道和头肾中Lc-TRAF5＿tv1及Lc-TRAF5＿tv2的表达水平在poly I:C、LPS、PGN刺激和变形假单胞菌感染刺激下均显著上调,提示Lc-TRAF5＿tv1及Lc-TRAF5＿tv2均能参与宿主的免疫反应。亚细胞定位分析结果表明Lc-TRAF5＿tv1与Lc-TRAF5＿tv2均为胞浆蛋白,不同的是LcTRAF5＿tv1在胞浆中均匀分布,而Lc-TRAF5＿tv2在细胞核周围有明显的聚集状斑点。此外,Lc-TRAF5＿tv1和Lc-TRAF5＿tv2的过表达均能显著诱导NF-κB和IRF3启动子的激活,且Lc-TRAF5＿tv1对NF-κB启动子的诱导活性显著高于Lc-TRAF5＿tv2;值得注意的是,Lc-TRAF5＿tv2与Lc-TRAF5＿tv1的共表达会显著抑制Lc-TRAF5＿tv1对NF-κB启动子的诱导活性,说明Lc-TRAF5＿tv2可能对大黄鱼TRAF5介导的NF-κB信号通路的激活具有负调控作用。