目的：有效模拟HIV-1包膜糖蛋白天然构象，在哺乳细胞中高效表达三聚体包膜糖蛋白。　　 方法：本研究以黑龙江省原代HIV-1分离株06044包膜为研究对象，通过PCR的方法扩增不含信号肽序列的包膜gpl20基因，并将其克隆至含有人类组织型纤溶酶原激活物(tPA)的信号肽序列的真核表达载体上，构建单体形式gpl20蛋白表达载体；或将其克隆至含有tPA信号肽序列和蛋白质三聚化模序MTQ的哺乳细胞表达载体上，构建三聚体形式gpl20蛋白表达载体。gpl20重组表达载体体外瞬时转染293T细胞，并通过western blot检测单体和三聚体形式gpl20蛋白的表达情况。　　 结果：获得具有正确读码框的HIV-1原代06044株gpl20基因，获得gpl20蛋白单体和三聚体的哺乳细胞表达载体pcT.06044gp120M/co和pcT.06044gp120T/co，经鉴定符合预期要求；重组质粒瞬时转染293T细胞后western blot分析，在变性条件下，两组细胞培养上清中均检测到单体形式gpl20蛋白；非还原条件下，pcT.06044gp120T/co转染组的细胞培养上清中检测到三聚体、二聚体和单体三种形式gpl20蛋白，其百分比分别为76％、14％和10％。 　　 结论：本研究成功构建了HIV-l原代06044株包膜gpl20单体和三聚体表达载体，并在哺乳细胞中成功表达了gpl20单体和三聚体蛋白，为进一步研究06044包膜的特征和研制有效的HIV-1包膜疫苗提供了前期实验基础。