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目的比较正常人和肥胖患者的血清磷脂转运蛋白（Phospholipid transfer protein, PLTP）活性，初步了解PLTP与肥胖（Obesity）的关系。研究体外培养的小鼠胚胎成纤维细胞（3T3-L1前脂肪细胞）在诱导分化过程中PLTP基因表达的变化，探究其与前脂肪细胞分化及脂质聚集之间的关系，进一步阐述PLTP对肥胖和动脉粥样硬化（Atherosclerosis, AS）的影响，为治疗肥胖和动脉粥样硬化提供新的途径。方法1.检测正常人和肥胖患者血清PLTP活性：选取50-60岁正常人（18.5≤体重指数（Body Mass Index, BMI）<25）和肥胖患者（30≤BMI）各11例，抽血离心后取血清，用人磷脂转运蛋白活性检测试剂盒检测血清中PLTP活性，研究正常人和肥胖患者血清PLTP活性有何区别。2.培养及诱导3T3-L1前脂肪细胞：用增殖培养基体外培养3T3-L1前脂肪细胞，接种六孔板待长满后继续用增殖培养基培养2-3天，之后联合应用1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(1-methyl-3-isobutyl xan, IBMX)、地塞米松（Dexamethasone）、胰岛素(Insulin)2天诱导3T3-L1前脂肪细胞分化，在以后诱导过程中用胰岛素维持培养。3.诱导细胞进行油红O染色：分别取诱导第0、2、4、8、11、14天细胞进行油红O染色，倒置显微镜观察细胞形态变化及脂质聚集情况。4.检测3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中PLTP mRNA的变化：分别取诱导第0、2、4、6、9、12天细胞提取总RNA，通过荧光定量PCR检测PLTP mRNA的表达变化。5.检测3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中PLTP蛋白的变化：分别取诱导第0、2、4、6、9、12天细胞提取总蛋白，western blot检测PLTP蛋白的变化。结果1.检测50-60岁正常人和肥胖患者血清得出肥胖患者血清PLTP活性较正常人高，约为正常人的2倍，为后续探究PLTP随3T3-前脂肪细胞的诱导分化而变化奠定理论基础。2.3T3-L1前脂肪细胞经油红O染色，肉眼可见培养皿底随诱导天数增加染色颜色加深。倒置显微镜下，随诱导天数增加，细胞体积增大变圆，第11天及以后含有红色脂滴的成熟脂肪细胞在视野中占90%以上。3. PLTP mRNA的变化：随着3T3-L1前脂肪细胞诱导分化的成熟，PLTP mRNA表达量逐渐增加，第2、4天PLTP mRNA表达量增加不明显，无统计学意义（P>0.05）。分化至第6、9、12天明显增高，分别比诱导第0天增加3.3倍（P<0.01）、3.7倍（P<0.01）和5倍（P<0.01）。4. PLTP蛋白的变化：通过western blot实验结果，可以看出在诱导分化不同阶段，PLTP蛋白表达水平与mRNA表达基本一致，在诱导第2、4天，PLTP蛋白表达量变化不明显，无统计学意义（P>0.05）。在诱导第6、9、12天达到较高水平，较诱导第0天分别增加3.2倍（P<0.05）、4.1倍（P<0.01）和3.4倍（P<0.05）。结论1.肥胖患者比正常人血清PLTP活性高，说明PLTP和肥胖成正相关。2.随着3T3-L1前脂肪细胞诱导天数增加，前细胞逐渐分化为成熟脂肪细胞，在第11天诱导率达到最高水平，以后随天数增加成熟脂肪细胞不再增加。PLTP的mRNA水平与细胞内脂质含量同步增加。3. PLTP蛋白水平随3T3-L1前脂肪细胞诱导天数增加而增多，说明PLTP的蛋白含量与细胞成熟同步，提示PLTP有可能参与甚至调节成熟过程。