【摘 要】
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背景:丙泊酚化学结构中含有一种酚羟基结构与维生素E等抗氧化剂相似，因此具有抗氧化活性。先前的体内和体外研究均证实这种静脉麻醉药能够减轻大脑的氧化应激反应，但是具体作用
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背景:丙泊酚化学结构中含有一种酚羟基结构与维生素E等抗氧化剂相似，因此具有抗氧化活性。先前的体内和体外研究均证实这种静脉麻醉药能够减轻大脑的氧化应激反应，但是具体作用机制还不十分清楚。近年来的研究表明丙泊酚诱导血红素化酶-1(heme oxygenase-1，HO-1)表达上调也可能是其细胞保护作用的机制之一。HO-1是一种抗氧化酶，同时具有抗炎和抗增殖作用，是细胞抗氧化和细胞保护防御体系的一个重要的组成部分。本实验的目的是研究丙泊酚预处理能否减轻神经细胞的氧化应激损伤，是否对HO-1蛋白表达产生影响以及是否受丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)信号通路调节。 方法:本研究中我们选择人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系作为体外模型研究丙泊酚的神经保作用。选择不同浓度(0～100μM)的丙泊酚预处理SH-SY5Y细胞，8小时后加入1 mM过氧化氢(H2O2)诱导氧化应激反应，共同孵育24小时。检测SH-SY5Y细胞生存率和细胞内活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)的生成量。Western-blot法检测丙泊酚组与对照组相比能否引起HO-1蛋白表达改变。为了检测MAPKs途径是否参与丙泊酚诱导的内源性HO-1蛋白表达改变，首先我们检测丙泊酚是否能引起p38亚族蛋白、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signal regulated kinase1/2，ERK1/2)与Jun氨基末端蛋白激酶(junn-terminal kinase，JNK)磷酸化改变，然后检测相应抑制剂的应用是否会影响丙泊酚诱导的HO-1表达改变。根据上述结果进一步检测ERK1/2的作用，检测ERK1/2抑制剂预处理能否阻断丙泊酚引起的神经细胞生存率和ROS生成量的变化。 结果:(1)与对照组相比H2O2组SH-SY5Y细胞生存率降低(P＜0.001);与H2O2组相比（50～100μM）propofol+H2O2组SH-SY5Y细胞生存率增高（P＜0.05）。与对照组相比H2O2组SH-SY5Y细胞ROS生成量升高（P＜0.01）;与H2O2组相比(25～100μM) propofol+H2O2组SH-SY5Y细胞ROS生成量降低(P＜0.001)。(2)与H2O2组相比(50～100μM) propofol+H2O2组SH-SY5Y细胞HO-1蛋白表达上调(P＜0.05)。与H2O2组相比(50～100μM)propofol+H2O2组p38、ERK1/2和JNK的磷酸化蛋白表达上调(P＜0.05)。ERK1/2抑制剂PD98059+propofol组与propofol组比较HO-1蛋白表达降低(P＜0.05)。(3)与propofol组比较ERK1/2抑制剂PD98059+propofol组细胞生存率降低，ROS生成增加(P＜0.05)。 结论:丙泊酚通过ERK1/2信号通路诱导HO-1蛋白表达上调保护氧化应激条件下的SH-SY5Y细胞。ERK1/2信号通路在丙泊酚通保护SH-SY5Y细胞对抗H2O2的神经保护作用中发挥重要作用。
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