【摘 要】
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细胞表面人表皮生长因子受体2(HER2)异常二聚体化是引起乳腺癌等肿瘤发生的关键驱动事件,是预测HER2靶向治疗效果的潜在新型标志物。但是HER2二聚体的临床应用研究却受制于缺乏简单实用、灵敏的细胞表面蛋白质二聚体分析技术。因此,HER2二聚体作为新型乳腺癌标志物的临床应用研究急需简单、灵敏、实用的蛋白二聚体原位检测新方法。本课题利用适体邻位杂交的特异性和无茎环式非线性HCR的高灵敏性,研发了一种
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细胞表面人表皮生长因子受体2(HER2)异常二聚体化是引起乳腺癌等肿瘤发生的关键驱动事件,是预测HER2靶向治疗效果的潜在新型标志物。但是HER2二聚体的临床应用研究却受制于缺乏简单实用、灵敏的细胞表面蛋白质二聚体分析技术。因此,HER2二聚体作为新型乳腺癌标志物的临床应用研究急需简单、灵敏、实用的蛋白二聚体原位检测新方法。本课题利用适体邻位杂交的特异性和无茎环式非线性HCR的高灵敏性,研发了一种适体共定位触发DNA纳米组装(CtDNA)的新策略用于HER2二聚体的原位放大成像。首先利用聚丙烯酰胺凝胶电泳、原子力显微镜和荧光分光光度计验证了无茎环式非线性HCR逐步组装形成DNA树枝状纳米结构的可行性。结果表明DNA树枝状纳米结构的组装具有较高的特异性、灵敏度和可控性。然后探索基于CtDNA策略用于乳腺癌细胞表面HER2/HER2同源二聚体和HER2/HER3异源二聚体检测的新方法。最后验证了新方法用于临床乳腺癌FFPE组织标本中HER2同源二聚体原位成像和定量分析的可行性。结果表明CtDNA策略是一种简单实用、灵敏的细胞表面蛋白质二聚体成像新技术,可用于乳腺癌HER2二聚体的原位检测。
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