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目的通过构建miRNA-451真核表达质粒，转染入人A549肺癌细胞中，研究miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡四个方面的影响，以及miRNA-451对人A549肺癌细胞中iNOS基因表达的影响的研究。方法通过miRBase数据库检索，查找hsa-miR-45序列，并由此hsa-miR-45序列设计出对应的两条寡核苷酸片段，通过人工合成，将片段转入pGenesil-1.1载体中，最后通过酶切鉴定、送检测序证实目的质粒构建成功，即miRNA-451真核表达载体（pGenesil-1.1-miRNA-451质粒）；利用LipofectamineTM2000脂质体转染试剂盒将目的质粒pGenesil-1.1-miRNA-451及空白阴性对照质粒pGenesil-1.1-control分别转染入人A459肺癌细胞中，再经过抗性筛选试剂G418筛选出遗传性稳定的细胞克隆，以此获得pGenesil-1.1-miRNA-451及pGenesil-1.1-control稳定表达的细胞株；运用Transwell体外侵袭实验检测转染前后细胞侵袭能力；划痕实验检测转染前后细胞迁移能力；流式细胞术检测转染前后细胞增殖与凋亡能力；MTT法检测细胞生长增殖能力；Western blot、免疫细胞化学及免疫荧光细胞化学检测iNOS蛋白表达差异。结果经酶切鉴定及测序证实pGenesil-1.1-miRNA-451重组质粒构建成功，稳定表达了pGenesil-1-miRNA-451的人A549肺癌细胞与稳定表达pGenesil-1.1-control的人A549肺癌细胞及未处理的人A549肺癌细胞相比，其细胞侵袭能力、迁移能力和细胞增殖能力均受到抑制影响，而细胞凋亡无明显变化；iNOS蛋白水平表达明显下调受到抑制。结论miRNA-451对人A549肺癌细胞侵袭转移和增殖能力均具有显著的抑制作用，但对细胞的凋亡作用影响不明显；miRNA-451对人肺癌A549细胞中iNOS基因的蛋白质水平具有明显的抑制作用。