本实验围绕羊栖菜硒多糖抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长展开研究,旨在探究羊栖菜硒多糖能够抑制胃癌细胞生长的作用机制。噻唑蓝(MTT)比色法检测羊栖菜硒多糖对SGC-7901细胞活性影响的实验结果显示:羊栖菜硒多糖有细胞毒作用,能够抑制SGC-7901细胞生长,并且随着其单位给药浓量的增大,SGC-7901细胞的相对致死率越高,IC50值为34.97μg/ml。羊栖菜硒多糖在人胃癌SGC-7901细胞上作用48h后,使用倒置显微镜观察各组细胞形态变化:随着羊栖菜硒多糖单位给药量增大,细胞生长密度降低,贴壁的细胞数量递减,细胞逐渐变圆和破碎。同样的,羊栖菜硒多糖在人胃癌SGC-7901细胞上作用48h后,加入荧光染料Hoechst33258,孵育后将细胞染成荧光蓝,使用荧光显微镜观察各组细胞状态的变化:阴性对照组的细胞质染色浅淡,细胞核染色均匀,且细胞核完整饱满,伴随给药羊栖菜硒多糖浓度升高,细胞质颜色越来越深,细胞核逐步变成半月形,直至近乎消失,而且细胞周围出现了凋亡小体。表现出细胞凋亡时的形态特征。为了更进一步地说明羊栖菜硒多糖致死细胞的成因,实验使用流式细胞术对给成梯度浓度的羊栖菜硒多糖作用48h的各组SGC-7901细胞进行分选。各组细胞经PI荧光染色后所检测出的结果,有力地证明了羊栖菜硒多糖能够诱导肿瘤细胞的凋亡,且凋亡率与给药浓度成正比例关系。给药各组凋亡率分别是:低剂量组(7.38±0.32)%、中剂量组(11.45±0.45)%、高剂量组(23.81 ± 1.16)%。在以上实验的基础上,本实验还探究了羊栖菜硒多糖诱导人胃癌细胞凋亡的本质。通过激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,不同浓度羊栖菜硒多糖对SGC-7901作用48h后,线粒体膜电位荧光强度分别为:低剂量组(36.95±0.41)、中剂量组(27.47±0.31)和高剂量组(18.06±0.20)。通过激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧的变化,不同浓度羊栖菜硒多糖对SGC-7901 作用 48h 后,活性氧荧光强度分别为:低剂量组(5.90±0.09)、中剂量组(8.42±0.27)、高剂量组(12.64±0.76)。通过激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,不同浓度羊栖菜硒多糖对SGC-7901 作用 48h 后,钙离子荧光强度分别为:低剂量组(9.10±0.06)、中剂量组(11.27 ±0.07)、高剂量组(23.59±0.42)。结果分析后,各组间均具有显著的统计学意义(P<0.01)。由此表明,羊栖菜硒多糖诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡是通过线粒体途径:羊栖菜硒多糖作用到细胞后,随着给药增加线粒体膜完整性被破坏,使线粒体膜电位降低,活性氧含量升高,钙离子浓度骤升,从而使线粒体通透转换孔开放,最后导致细胞凋亡。纵观以上实验,此课题在体外实验方面证明了羊栖菜硒多糖能诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,并推断其凋亡途径可能是通过线粒体途径发生的。