青蒿素对db/db小鼠糖脂代谢的影响及其机制

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目的:探索青蒿素类药物(蒿甲醚)对2型糖尿病模型—db/db小鼠糖脂代谢的影响及其潜在机制。方法:取8周龄雄性C57BL/KsJ-db/db小鼠分为4组(n=6):空白对照组(NC组)(db/+小鼠,1%甲基纤维素灌胃),糖尿病组(DM组)(db/db小鼠,1%甲基纤维素灌胃),蒿甲醚100组(ATM100组)(db/db小鼠,1%甲基纤维素+蒿甲醚100mg/kg灌胃),蒿甲醚200组(ATM200组)(db/db小鼠,1%甲基纤维素+蒿甲醚200mg/kg灌胃)每组各6只,共干预4周。每2天测量小鼠体重,每3天对各组小鼠摄食量进行称重并评估平均每日摄食量和体重改变量。小鼠饮水量测定周期为2天,小鼠尿量测定周期为3天,空腹血糖测定周期为7天。采用小鼠尾静脉采血法测定小鼠空腹血糖,注意采血前应保证小鼠有8小时的过夜禁食时间,测量仪器采用罗氏血糖仪及配套试纸。采用腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)和胰岛素耐量试验(IPITT)来评估小鼠对葡萄糖的耐受力以及对胰岛素的敏感性,通过生化试剂盒测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)水平。取小鼠整肝称重。HE染色法观察小鼠胰腺和肝脏的形态改变。Western-blog法分析小鼠肝脏中AMP活化蛋白激酶(AMPK)、胰岛素受体(IRβ)以及葡萄糖转运蛋白体4(GLUT-4)蛋白的表达情况。采用生物蛋白芯片检测肝脏中炎性因子表达情况。结果:1.与空白对照组相比,糖尿病组的体重增长率、摄食量、饮水量均明显升高,而两组蒿甲醚组的摄食量、饮水量及体重增长率均显著降低(P<0.05);2.蒿甲醚干预下两组小鼠空腹血糖均呈剂量相关明显下降;与空白对照组相比,糖尿病组IPGTT曲线下面积(AUC)明显增高(P<0.05),蒿甲醚100组和蒿甲醚200组IPGTT曲线下面积(AUC)明显降低(P<0.05);3.与空白对照组相比,糖尿病组IPITT曲线下面积(AUC)明显增高(P<0.05),蒿甲醚100组和蒿甲醚200组IPITT曲线下面积(AUC)明显降低(P<0.05);4.与空白对照组相比糖尿病组的胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及游离脂肪酸(FFA)水平均明显升高,蒿甲醚干预下可显著降低小鼠血清中的TC、TG及FFA水平,并呈剂量依赖关系(P<0.05);5.蒿甲醚改善了db/db小鼠的胰岛空泡变性;6.蒿甲醚改善了小鼠整肝的大小及脂质沉积外观,并改善了db/db小鼠的肝脂肪变性;7.蒿甲醚明显增加小鼠肝脏中AMPK、GLUT-4及IRβ蛋白的表达;8.蒿甲醚可明显增加肝脏中T细胞免疫CD27L、CD30因子表达,降低炎症介质IL-2、IL-6以及肝脏炎症相关巨噬细胞衍生趋化因子(MDC)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP-2)和巨嗜细胞炎性蛋白-1g和(MIP-1g)因子的表达。结论:1.蒿甲醚可以明显降低db/db小鼠的体重以及血糖水平;2.蒿甲醚有望通过激活AMPK途径从而改善db/db小鼠的糖脂代谢;3.蒿甲醚可以通过改善免疫微环境从而预防db/db小鼠肝脏炎症以及脂肪肝的形成。
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